现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的高低。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关试验:
试验原理:有毒物质会使动物细胞发生染色体变异,根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(一下称Q值),可判断该化学物质的毒性的高低。
材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微镜照片。
试验步骤:
(1)制备细胞悬浮液:
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入 液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养,观察甲、乙两种物质的毒性有无及高低:
①取3个洁净的培养瓶,编号A、B、C,然后依次加入 。
②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的适宜浓度的甲、乙溶液,C瓶中加入 ,振荡、摇匀。
③把3个培养瓶放在37度(或适宜温度)的恒温箱中培养。
(3)制作临时装片:
①当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,再一次用 液处理,然后加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,加2滴 进行染色,3—5min后,盖上盖玻片。
(4)镜检和统计:
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜观察,然后再用高倍镜,寻找处于有丝分裂
期的细胞,并与小白鼠正常细胞有丝分裂同一时期高倍显微照片进行对比,统计并计算该期变异的细胞占该细胞总数的百分数并做好记录(Q值)。
结果分析与结论:
(1)在试验中,C培养瓶起 作用。
(2)经研究人员试验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%,QB=12.5%.
QC=0.01%,由此可得出该试验的结论是 。