如右图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是(　　)。

A．操作前要将接种环放在火焰旁灭菌

B．划线操作须在火焰上进行

C．在5区域中才可以得到所需菌落

D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌