海洋中的发光细菌具独特的生理特性，可作为环境监测的指标生物。
I.（1）使用             法（答二种），可在固体培养基上获得单菌落，纯化发光菌株。
（2）细菌这类微生物在基因工程中有重要应用，试列举其中一项。
II．现利用发光细菌对海水重金属污染程度进行生物毒性监测，请完善下列实验设计并回答问题：
实验原理：细菌代谢正常时，发光强度稳定；当重金属影响到其代谢时，发光会受到抑制，抑制程度用抑光率（发光被抑制的百分率）表示。
实验材料：发光菌悬液、可能受重金属污染的待测海水水样、3%NaCl溶液、荧光分光光度计（用于测定细菌发光强度）、试管等。
（1）实验步骤：按下表配制待测海水样品稀释液。

组  别	1	2	3	4	5
3%NaCl溶（mL）		4.74	4.49	4.24	3.99
海水样品（mL）		0.25	0.50	0.75	1.00
发光菌悬液（mL）		0.01	0.01	0.01	0.01
混合液中海水浓度（%）		0.05	0.10	0.15	0.20

请完善实验步骤：
①1号试管中应加入：3％NaCl溶液、海水样品、发光菌悬液分别为          mL。
②各试管静置15min后，                                                    。
（2）计算相对抑光率：按照公式T％=                          计算各组相对抑光率。
（3）如果测得上述各组相对抑光率如下：

组别	1	2	3	4	5
相对抑光率（%）	0	6	13	17	23

①请绘制海水浓度对相对抑光率影响的曲线。
②根据结果可以判断待测海水样品                                      。