转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。下图一是通过生物工程培育能产生人胰岛素烟草的过程。请据图回答：

（1）基因工程的核心步骤是______（填字母）。此过程所需的工具酶是                    
（2）下图二是运载体和反转录得到的胰岛素基因的片段，已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC－，
限制酶Ⅱ的识别序列和切点是－↓GATC－。GeneI和 GeneII为质粒上的标记基因，根据图分析, 应用限制
酶          切割质粒，用限制酶        切割目的基因。构建的重组质粒中,除含有外源基因、标记基
因外,还必须含有         和          。
（3）B过程中，常用_________处理使细菌成为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入。
（4）如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功，可以采用                方法。