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  • 科目:生物
  • 题型:综合题
  • 难度:中等
  • 人气:1141

(13分)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:


(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越__________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ切割,原因是____________________________________________________________________。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_____________________________________________________________________
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入_______酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了______________________________________
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在____________________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
(8)cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针。制备cDNA探针时,首先需提取、分离获得__________作为模板,在__________的催化下合成cDNA探针
(9)基因工程中利用乳腺生物反应器生产-抗胰蛋白酶,应选用__________切割含有目的基因的DNA片段和载体,并用__________方法导入__________中,再利用SRY探针 (Y染色体上的性别决定基因)进行检测,将检测反应呈__________(选填“阳”、“阴”)性的胚胎进行移植培养。

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(13分)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、