回答下列有关基因工程的问题
细菌、真菌等微生物产生的β-葡萄糖苷酶是一种耐热纤维素酶,可分解自然界中的纤维素获得能源。现可通过基因工程将β-葡萄糖苷酶基因(bglB基因)与图28的质粒重组并导入大肠杆菌获得大量有活性的β-葡萄糖苷酶。(质粒中ori为质粒复制所必需的DNA序列,启动子是使转录开始的一段DNA序列,终止子是提供转录终止信号的DNA序列,抗生素抗性基因为标记基因,其余为不同限制酶的酶切位点,切割形成的黏性末端均不相同)
(1).从高产β-葡萄糖苷酶的黑曲霉品种中提取到相应的RNA,进而获得bglB基因的DNA序列,这种获取目的基因的方法是____________________。
(2).为避免自身环化并确保bglB基因与图一质粒准确重组,可选用的限制酶是( )
A NdeI和XbaI B NdeI和BamHI
C XbaI D PstI E BamHI
(3).bglB基因通过 酶与质粒结合形成重组质粒。
(4).图二培养基中含有刚果红和纤维素,可用于筛选纤维素酶产量高的重组菌,原理如图三。
据此分析,图二中的[ ]菌落即为纤维素酶产量最高的菌株。
(5).在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高基因的突变率。与用诱变剂直接处理微生物相比,上述育种技术获得热稳定性高的bglB基因的效率更高,其原因是在PCR过程中( )(多选,2分)
A.仅针对bglB基因进行诱变 |
B.bglB基因产生了定向突变 |
C.bglB基因可快速累积突变 |
D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 |