Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：

(1)步骤①中所选的卵母细胞应处于________期。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其________分离出ES细胞，ES细胞在形态上表现为________的特点。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag₂基因的________。可以根据Rag₂基因的核苷酸序列设计合成________，利用________技术扩增Rag₂基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag₂基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有________酶的酶切位点。
(4)为检测Rag₂基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag₂蛋白的抗体进行________。