微生物接种方法很多，平板划线法是最常用的一种。下图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④。下列操作方法错误的是

A．划线操作时，将沾有菌种的接种环插入培养基

B．平板划线后培养微生物时要倒置培养

C．不能将第④区域的划线与第①区域的划线相连

D．在②～④区域中划线前后都要对接种环进行灭菌