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  • 科目:生物
  • 题型:实验题
  • 难度:较难
  • 人气:140

某一质粒载体如图所示, 外源 DNA 揷入到 Amp r Tet r 中会导致相应的基因失活( Amp r 表示氨苄青霉素抗性基因, Tet r 表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用 BamHl 酶切后, 与用 BamHl 酶切获得的目的基因混合, 加入 DNA 连接酶进行连接反应, 用得到的混合物直接转化大肠杆菌, 结果大肠杆菌有的末被转化, 有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种, 分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有揷入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列 问题:

(1) 质粒载体作为基因工程的工具, 应具备的基本条件有                   (答出两点即可)。而作为基因表达载体, 除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。

(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,末被转化的和 仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是       ;并且          的细胞也是不能区分的,其原因是       。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落, 还需使用含有是            的固体培养基。

(3)基因工程中, 某些噬菌体经改造后可以作为载体, 其 DNA 复制所需的原料来自于   

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某一质粒载体如图所示,外源DNA揷入到Ampr或Tetr中会