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  • 科目:生物
  • 题型:实验题
  • 难度:较难
  • 人气:76

科研人员构建了可表达 JV5 融合蛋白的重组质粒并进行了检测,该质粒的部分结构如图甲所示,其中 V5 编码序列表达标签短肽V5。

(1)与图甲中启动子结合的酶是______。除图甲中标出的结构外,作为载体,质粒还需具备的结构有____________(答出2个结构即可)。

(2)构建重组质粒后,为了确定 J 基因连接到质粒中且插入方向正确,需进行 PCR 检测,若仅用一对引物,应选择图甲中的引物______。已知 J 基因转录的模板链位于b链,由此可知引物 F1 与图甲中J基因的______(填“a链”或“b链”)相应部分的序列相同。

(3)重组质粒在受体细胞内正确表达后,用抗 J 蛋白抗体和抗 V5 抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平,结果如图乙所示。其中,出现条带 1 证明细胞内表达了______,条带 2 所检出的蛋白______(填“是”或“不是”)由重组质粒上的J基因表达的。

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科研人员构建了可表达J﹣V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测,