下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
资料1 巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，同时AOX1基因也会因受到诱导而表达。[5ˊAOX1和3ˊAOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子]。
资料2 巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。
（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，需要用到_____ ___处理。
（2）获取HBsAg基因时，可利用 、 方法获取。
（3）构建的重组质粒中有5ˊAOX1、 3ˊAOX1(TT)和HBsAg基因外，还应有 。
（4）步骤1中的方法是 ，此时的大肠杆菌处于 状态。
（5）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用__________________方法进行检测。
（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行____ ____并分泌到细胞外，便于提取。
质粒能成功转入植物细胞，并将质粒上的一部分外源DNA整合到植物的DNA中。下图表示利用质粒进行转化获得抗除草剂大豆的过程。请据图分析回答：
(1)整合了目的基因的重组质粒，在组成上还需含有启动子、终止子和________。
(2)过程④运用了细胞工程中的________________技术，该技术的理论依据是__________________；在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行____________________。
(3)为了检测通过④过程获得的幼苗是否具有抗除草剂的特性，可采用的方法是__________________________________________________________________。
科学家通过基因工程方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如图所示：
(1)基因工程的操作程序主要包括的四个步骤是：目的基因的获取、基因表达载体的构建、____________、目的基因的检测与鉴定。
(2) 将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，该题中涉及的是 ，Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞中并成功实现表达的过程，称为 。
(3)目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是______，这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是__________。
(4) 抗虫棉能抗棉铃虫的生态效果显著，有人认为抗虫棉就是无虫棉花，不必防治害虫，你认为这种观点是 。理由是 。更有人认为这种抗虫棉产生的Bt毒蛋白，存在于棉花纤维内，由此棉花制成的服装等产品会影响人体的健康。你认为这种说法是 。理由是 。
下图是转基因猕猴培育过程示意图，请据图回答：
(1)过程②中常用 的方法将目的基因导入受精卵。
(2)在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供CO2气体以维持 。
(3)从雄性猕猴附睾中取出的精子不能在体外使卵母细胞受精，需要用人工配置的 使精子获能；上述流程中必须要将供体母畜体内的卵母细胞冲取出来。
(4)图中过程⑦称为 ，为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同，此前需对代孕雌猴作 处理。
下图是培育试管牛的过程，请回答。
（1）从良种母牛采集卵母细胞后，用____________激素处理卵细胞，使其排出更多的卵子；从良种公牛采集的精子需__________后才能进行受精作用。
（2）在体外培养受精卵时，除了给予适量O2维持细胞呼吸外，还需要提供____气体以维持培养液的______。
（3）图中过程A称为________，在此之前可以采用______________技术获得同卵双胎或多胎。
（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的基因导人牛受精卵，最常用的导人方法是_____________，获得转基因母牛后，如果牛奶中_________________________，即说明目的基因已经表达。
补充正常凝血因子F8可以治疗甲型血友病，因此可以利用转基因技术人工生产F8。某种大肠杆菌的质粒中含有β-半乳糖苷酶α片段序列，大肠杆菌的DNA分子中则含有β-半乳糖酶ω片段序列，由于天然大肠杆菌同时具备这两种片段序列，可以使培养基中含有X-gal底物转变成蓝色产物，当缺少任意一个α或ω片段序列，X-gal底物不能转变成蓝色产物。HindⅢ、 EcoRI、BamHI分别为三种限制性内切酶，下图中箭头所指为三种限制酶的切点。
（1）应选用的限制性内切酶是 ，选择的依据是
（2）限制酶作用的化学键是 。
（3）控制F8的基因也可以通过人体细胞相应的mRNA来合成，该合成的过程称为 。将经转基因技术处理过的质粒导入大肠杆菌后，再将大肠杆菌接种到含有X-gal底物的培养基培养一段时间后，培养基中出现较多的蓝色菌落，这是因为 。
（除标注外，每空1分，共10分）下图是培育农作物新品种的过程，请据图回答：
（1）若经过②过程产生的子代总数为1600株，则其中表现型与AAbb表现型一样的植株理论上有 株。过程③为________________。
（2）图中⑤⑥过程所用的育种方法是 ，原理是 ；过程⑤利用了植物细胞 ；过程⑥所用的试剂是 。
（3）在AABB×aabb杂交过程中，若A基因所在的同源染色体在减数第一次分裂时不分离，AABB个体产生的配子类型是 。
（4）与“过程⑦”的育种方法相比，“过程④”育种的优势是__________________。
如今，从土豆、草莓到西红柿，各种各样的转基因产品已经进入寻常百姓家，更有资料显示，我国餐桌上有50%以上的大豆色拉油属于转基因食品。然而近年来，有关转基因食品是否影响健康的争论不绝于耳。例如，1999年，美国康奈尔大学Losey等人将转Bt基因(苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因)玉米花粉撒在苦芭菜上，喂食黑脉金斑蝶，4 d后死亡率达44%，而对照组无一死亡，研究者认为该转基因玉米对非靶生物有毒。
(1)据报道转基因作物大面积种植已达7年，食用转基因食品的人群至少已有10亿之多，至今没有转基因食品不安全的任何实例。转基因食品是安全的，试分析原因。
________________________________________________________。
(2)自1983年转基因作物在美国问世以来，用生物技术改造农产品的研究与应用进展飞快。2001年全球转基因作物的种植面积达到了5×107 hm2。试问：转基因产品到底有什么优势？
___________________________________________________________。
(3)你是怎样理解转Bt基因(苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因)玉米花粉对非靶生物有毒的？
____________________________________________________________
(4)有人认为转基因生物会造成基因污染，危害生态系统的稳定性。你是怎样理解的？
___________________________________________________________
[生物——选修3：现代生物科技专题]人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因奶牛的乳汁中获得。下图表示利用奶牛乳汁生产人组织纤溶酶原激活物的培育过程：
（1）htPA基因cDNA可通过克隆筛选获得，该cDNA比人染色体上的htPA基因短，原因是该cDNA没有 。构建表达载体时，必须将htPA基因cDNA与牛乳腺蛋白基因的 等调控组件重组在一起。
（2）通过①形成图中③的过程中，通常取培养 代以内的细胞，原因是 。
（3）图中“未受精的卵”是指 的卵母细胞，而不能用普通的体细胞作为受体细胞，原因是“未受精的卵” 。
（4）⑦与⑥的遗传性状不一样的原因是 。
（5）图示过程中涉及的科学技术有转基因技术、 、 、胚胎移植等。
端粒是真核细胞染色体末端的特殊结构，由DNA重复序列和结合蛋白组成。研究发现，随细胞不断增殖，端粒逐渐缩短。当细胞端粒缩至一定程度时，细胞停止分裂。端粒酶由RNA和蛋白质组成，其中RNA是一段模板序列，可指导合成端粒DNA的重复序列。人体内大多数癌细胞都表现出较高的端粒酶活性。请分析回答：
（1）端粒酶的作用相当于HIV病毒中的 酶。结合端粒酶的作用推测，癌细胞表现出恶性增殖而不衰老死亡的特点可能是由于 。
（2）和端粒酶的化学成分最接近的细胞器是_______。
A、线粒体 B、核糖体 C、中心体 D、内质网 E、高尔基体 F、溶酶体
（3）双歧杆菌是人体肠道内的自然菌群，具有抗肿瘤作用。研究人员从双歧杆菌中提取出双歧杆菌脂磷壁酸（LTA），加入细胞培养液中培养人白血病细胞株HL-60，检测LTA对细胞增殖的影响。LTA浓度和实验结果如图1所示。
①此实验中还有一组对照实验，其处理是_________________。
②选用LTA浓度为40μg/ml的培养液中培养的细胞，测定端粒酶活性，结果如图2所示。综合两个实验结果，可以得出的结论有：
结论一：LTA能通过_______________来抑制_______________。
结论二：______________。
结论三：______________。
如图为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段，其中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0．7Kb）、PvuⅠ（0．8Kb）等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。已知1kb=1000个碱基对，请回答下列问题：
（1）片段D为目的基因中的某一片段，则DNA聚合酶和DNA连接酶的作用部位依次是______________（填数字）。
（2）图中能作为目的基因运载体最理想的质粒是______________ （填A/B/C），请据图分析，其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是______________、______________。
（3）用EcoR I完全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒，并进行电泳观察，可出现长度分别为1．1kb和______________kb的两个片段，或者长度分别为______________的两个片段。（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoR I的识别位点之间的碱基对忽略不计）。
（4）将分别用限制酶PvuⅠ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶连接后，进行大肠杆菌受体细胞导入操作，之后，受体细胞的类型（对抗生素表现出抗性R或敏感性S，蓝白代表菌落颜色）包含______________ （多选）。
A．ApR、蓝色 B．ApR、白色 C．ApS、蓝色 D．ApS、白色
（5）动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是_____________。
A．受精卵能使目的基因高效表达
B．受精卵可发育成动物个体
C．受精卵基因组更易接受DNA的插入
D．受精卵尺寸较大，便于DNA导入操作
在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值。右图所示是获得转基因莴苣的技术流程，请据图回答下列问题：
（1）获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和________。
（2）①过程需要的酶有________、________。
（3）重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外，还必须含有启动子、终止子和________，这样才能构成一个完整的基因表达载体。
（4）如果受体细胞C1是土壤农杆菌，则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的________，使目的基因进入受体细胞C2，并将其插入到受体细胞C2中________上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴苣。经②过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达，在分子水平上可用________法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因莴苣培育成功。
下图表示应用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程。回答下列问题：
（1）①过程表示______________；②过程用到的工具酶是________________。
（2）构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有 ，以利于目的基因的表达。③过程常用的方法是 。
（3）从分子水平上鉴定目的基因是否转录可采用_____________技术。
（4）细胞Ⅱ的特点是 。
（5）若要预防H7N9禽流感，可用图中的________________作为疫苗。
（6）传统农业中，植物秸秆往往是通过焚烧以便使其中的无机盐还田，该做法的最大缺点是会造成环境污染；而现代农业中，在充分利用能量、减少环境污染的同时，通过饲养家禽、家畜，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这主要体现了生态工程的________________原理。
以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，请据图回答下列有关问题：
（1）图中对良种奶牛进行处理时用到的激素是 ，②过程使用的是 酶。③表示 技术，
（2）如果转基因牛D的牛奶中含有 ，则说明血清蛋白基因在个体水平已表达成功，其他细胞中不含血清蛋白是 的结果。
（3）图中A和B分别是指 和 。
分）绿色荧光蛋白(GFP)能在蓝光或紫外光下发出荧光，基因工程中，GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠，下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程：
（1）基因工程中，GFP基因属于 ，获取该基因的工具酶是 。
（2）构建基因表达载体的目的是 。
（3）过程②常用的方法是 ，在进行过程④前，利用 技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠。
（4）胚胎工程的最后一道工序是 ，进行④过程的优势是 。
（5）绿色荧光小鼠培育过程涉及的生物技术有 （至少回答两点）。
试题篮
()
粤公网安备 44130202000953号
