下列关于基因工程中有关酶的叙述，不正确的是（ ）
| A．限制酶水解相邻核苷酸间的化学键打断DNA |
| B．DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接 |
| C．限制酶广泛存在于各种生物中 |
| D．逆转录酶以一条RNA为模板合成互补的DNA |
根据所学知识回答问题：
（1）基因工程中基因表达载体除包括目的基因外，还必须有 及标记基因等。
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 中。植物组织培养的主要原理是植物细胞具有 ，具体过程是在 和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过 产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项） 。
【生物——选修3 现代生物科技专题】“基因靶向”技术是指利用细胞脱氧核糖核酸（DNA）可与外源性 DNA 同源序列发生同源重组的性质，定向改造生物某一基因的技术。如果外源基因随机插入，会因位置效应引起紊乱，而“基因靶向”技术很好地解决了这一问题。请回答下列问题：
（1）“基因靶向”技术中构建基因表达载体需要用到 酶和DNA连接酶。一个基因表达载体的构成，除了目的基因，还需有启动子、终止子、 等部分。
（2）ES 细胞来自第3.5天小鼠囊胚中的 。 在胚胎移植前，通过 技术可获得较多的胚胎。在胚胎移植过程中，供体、受体动物选择好后，要用激素进行 的处理，使供、受体的生理状态相同，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。
（3）取患者的淋巴细胞或者脐带血细胞作为 ，插入正常的外源基因后，再回输体内，以替代、修复或纠正有缺陷的基因，这种方法称为 ；
现代人们对生物工程技术发挥的作用褒贬不一，但生物工程在为人们提供需要的生物新品种或新产品方面确实发挥了重要作用。请回答下列问题：
（1）转人生长激素基因牛发生的可遗传变异是__________，③过程用到的生物技术手段有____________。如欲得到基因型相同的两头牛犊，可在__________________阶段，采用____________技术达到此目的，两头牛的性别_________（填“相同”或“不同”）。
（2）将无限增殖调控基因（prG）导入浆细胞制备单克隆抗体的过程中，应进行多次_____检测，Ⅲ代表的细胞具有_______的特点，具有此类功能的细胞还可以通过_______（技术）方法获得。
（3）在抗虫棉培育过程中，将棉花细胞培养成抗虫棉植株所依据的原理是____________，④过程常用的方法是___________法。若要获得该种抗虫棉的无病毒植株，应选用其__________处的组织进行培养。
为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上转运肽的基因相连，导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。
（1）如图，选用图中的限制酶 处理两个基因后再用 酶处理，得到 （填图中字母）端相连的融合基因。
（2）将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的 中，构建 并导入农杆菌中。
（3）将获得的农杆菌接种在含 的固体平板上培养得到单菌落，利用液体培养基震荡培养，得到用于转化的浸染液。
（4）利用 法将目的基因导入油菜叶片中，并通过筛选获得转基因油菜细胞，通过 技术可培育成转基因油菜植株。
随着科学技术的发展，人们可以根据人类的需求来改造生物的性状，在许多领域取得了可喜的成果，图中是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解，根据下图回答：
（1）在此过程中涉及的动物细胞工程技术有 、_________________。
（2）在基因工程中，我们称②为____ 。为了使血清白蛋白基因在羊恰当的细胞中表达，基因表达载体中除②片段外，还应该有牛的乳腺蛋白的 ，其是__________识别和结合的位点。
（3）图中①一般经____ ___处理可以得到③，从③到④的过程中一般用未受精的 细胞去核后作为受体，不用普通的体细胞。
（4）要实现⑦批量生产血清白蛋白，则要求③的性染色体是 。
人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
（1）检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_____ ____技术。
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其_________。图中早期胚胎可用人工方法从羊输卵管内获得,该过程称为 ; 也可从羊体内取出卵子,通过 后进行早期胚胎培养获得。第5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎__ ___期开始的标志。
（3）利用 和胚胎移植技术可获得多个转基因个体。图中早期胚胎通过胚胎移植技术移入代孕母羊子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用 方法保存。
（4）胚胎干细胞（ES）可由 中分离培养获得的一类细胞。
绿色荧光标记的X染色体DNA探针（X探针），仅能与细胞内的X染色体DNA的一段特定序列杂交，并使该处呈现绿色荧光亮点。同理，红色荧光标记的Y染色体DNA探针（Y探针）可使Y染色体呈现一个红色荧光亮点。同时用这两种探针检测体细胞，可诊断性染色体数目是否存在异常。医院对某夫妇及其流产胎儿的体细胞进行检测，结果如图所示。下列分析不正确的是
| A．Y染色体DNA上必定有一段与Y探针相同的碱基序列 |
| B．据图分析可知妻子患X染色体数目异常遗传病 |
| C．妻子产生染色体数目正常的卵细胞的概率是1/2 |
| D．从胎儿的染色体组成可以推测，该胎儿是正常精子与异常卵细胞结合形成 |
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有__________和__________。
（2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：
AATTC……G
G……CTTAA
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是_____________________。
（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即__________DNA连接酶和__________DNA连接酶。
（4）反转录作用的模板是__________，产物是__________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用__________技术。
（5）基因工程中除质粒外，_______________和______________也可作为运载体。
（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是______________。
以下说法正确的是（ ）
| A．所有的限制 酶只能识别一种特定的核苷酸序列 |
| B．质粒是基因工程中唯一的运载体 |
| C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 |
| D．DNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键 |
关于基因工程的操作步骤，正确的是（ ）
①将目的基因导入受体细胞 ； ②目的基因与运载体结合 ；
③提取目的基因 ； ④目的基因的检测与鉴定。
| A．③①②④ | B．②③①④ | C．①③④② | D．③②①④ |
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子用限制酶Sma Ⅰ切割时，需断开 个磷酸二酯键。
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。
（3）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。
（4）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
关于基因工程下列说法正确的有（ ）
① 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体
② 基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工
③ 限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列
④ 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达
⑤ 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列
⑥ 基因工程可以将一种生物的优良性状移植到另一种生物身上
⑦ 质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的运载体
| A．2项 | B．3项 | C．4项 | D．5项 |
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