[生物——选修1:生物技术实践]为从土壤中筛选能有效降解有机化合物X的细菌,研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌(目的菌)。下图是从土壤中筛选出该细菌的过程示意图,下表是分离纯化的结果。请回答下列问题:
(1)培养基中的有机化合物X主要为目的菌提供 等营养要素。从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时,应选用 (填“固体”或“液体”)培养基。
(2)配制成10-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL,移人盛有___ _ mL无菌水的试管中,并依次配制10 -2~10 -10的梯度稀释液。
(3)在分离、纯化过程中,图中②、③过程接种的方法分别为____、 。在倒平板前,应对玻璃器皿和培养基灭菌,灭菌方法是 。
(4)分析菌种的分离纯化结果,应选择为 号菌落进行扩大生产,原因是 。
(5)实验过程中还需配制空白培养基作为对照,其目的是____。
茶饮料主打“健康牌”,极少添加人工合成的色素、香精等添加剂,更多利用从植物中提取的天然成分。请回答:
(1)红茶菌液是一种传统的活菌饮料,由酵母菌、醋酸菌和乳酸菌共同发酵产生。纯化菌种时,在固体培养基上常用 ________ 法接种菌种。在接种活菌前,将红茶糖液煮沸后冷却,煮沸的目的是_______。
(2)茶饮料所用的胡萝卜素,通常采用____________法从胡萝卜中提取;提取后常用____________法对提取物中的胡萝卜素进行鉴定。
(3)茶饮料所用的植物芳香油的提取流程如下:茉莉花+水→过程A→油水混合物→油层分离与粗提取→过程B→过滤→茉莉油。过程A表示____________,过程B表示向粗提精油中加入____________,目的是____________。
【生物—选修模块1:生物技术实践】
请回答与微生物分离和培养有关的问题:
(1)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是___________(填序号)。为减少误差,在设置平板是一般要______或以上数目平板;若统计出在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个,所用稀释液的体积为0.2ml,则每克样品中的菌落数为_______________。
①土壤取样
②称取10g土壤加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液
③吸取0.1ml溶液进行涂布平板
④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度
(2)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。其中对培养基和培养皿进行灭菌的常用方法分别是___________、__________;要求实验操作应在_____________进行,以避免周围环境中微生物的污染。
(3)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌,而寻找耐热菌要从高温热泉中,这说明寻找目的菌的方法是:______________。
研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。
(1)柚皮易焦糊,宜采用_________法提取柚皮精油,新鲜的橘皮要用浸泡处理,该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。
(2)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供__________。电泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其分子量越大,电泳速度___________。
(3)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
(2)橘皮油也可用萃取法来提取,原因是 。分析下图,提高萃取效果的方法是 、 。
在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。
(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行____ __处理。
(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,上述培养皿中培养基为__ __体培养基。对培养基进行灭菌,常采用的方法是______________。实验操作者的双手用________消毒。
(3)在第2次及其后划线总从上次划线末端开始的原因是________________。
(4)培养后发现,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是__________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。
(5)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是___________,有透明带菌落利用的氮源主要是____________,据此可筛选出目的菌。
微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识,分析回答问题:
(1)培养基的制备需经过计算、称量、溶化和A:__ __、B:___ __等过程,上述过程中需要在超净工作台上操作的是_______。
(2)纯化菌种时为得到单菌落,常采用的接种方法是平板划线法和D:___ __法,其中需用接种环进行操作的是__________。
(3)为达到筛选土壤中分解尿素细菌目的,平板内固体培养基应以尿素作为唯一的_ __,培养基中加入_____ ___指示剂培养后,若变红以鉴定其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌,在选择培养后须进行E:___ _和F:___ ___过程,一般通过观察_____ __的有无挑选出所需菌种。
用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌,经培养、搅拌、离心,检测到上清液的放射性占10%,沉淀物的放射性占90%。上清液带有放射性的原因可能是
A.离心时间过长,上清液中析出较重的大肠杆菌 |
B.搅拌不充分,吸附在大肠杆菌上的噬菌体未与细菌分离 |
C.噬菌体侵染大肠杆菌后,保温时间过长,大肠杆菌裂解释放出子代噬菌体 |
D.32P标记了噬菌体蛋白质外壳,离心后存在于上清液中 |
若1个35S标记的大肠杆菌被1个32P标记的噬菌体侵染,裂解后释放的所有噬菌体
A.一定有35S,其中有1个含有32P | B.一定有35S,其中有2个含有32P |
C.一定有32P,其中有2个含有35S | D.一定有32P,但不含35S |
猪饲料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中,猪由于缺乏有关酶,造成磷源浪费,而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染。下图为对植酸酶进行不同处理时其活性与温度的关系。
(1)生产中从土壤中筛选出产酶菌株,土壤悬液首先经80℃处理15分钟,其目的是筛选______。
(2)在产酶菌株的筛选过程中,固体培养基中添加不溶于水的植酸钙,植酸钙被植酸酶分解后可以在培养基上产生透明圈,可根据透明圈的__________选择目的菌株。
(3)所得菌株还需要进一步测定植酸酶的活性,活性的测定可以用__________作为底物,活性可用_________表示。
(4)在生产中_________(填“未固定”或“固定化”)植酸酶更适于添加到猪饲料中,使用的最适温度为_____________℃。
下列生物学实验操作,能够顺利达到实验目的的是
A.在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通人无菌空气制作果酒 |
B.在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单个菌落 |
C.将切下的胡萝卜外植体直接接种在培养基上获得愈伤组织 |
D.将土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌 |
常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。请分析回答:
(1)为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该将器皿 。右图是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙指示的结构依次是 。
(2)在制作牛肉膏蛋白胨培养基时,要求将称好的牛肉膏连同 一同放入烧杯,加入少量的水,加热。
(3)用高压灭菌锅灭菌后的培养基,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你可以用 办法来估计培养基的此温度。
(4)取从自然界中采集的葡萄,然后在超净台上将葡萄置于0.1% 水溶液中进行表面消毒5min,再用 将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后进行纯化培养。下图甲是经上述纯化培养的结果,在培养基上接种时划线的顺序是依次是 。(用编号表示)。研究者在经过甲接种后得到了一个经培养后菌落分布如图乙所示的平板,推测接种时可能的操作失误是 。
(5)下表为某学生在筛选培养能利用木糖发酵的酵母菌时所配置的培养基配方,请指出其中的明显不足之处 。
K2HP04 |
FeS04 |
MgS04.7H20 |
NaNO3 |
KCl |
蔗糖 |
木糖 |
琼脂 |
蒸馏水 |
0.1g |
0.001g |
0.05g |
0.3g |
0.05g |
3.0g |
3.0g |
2.og |
100ml |
(6)再将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上,并将所得的重组质粒导入酵母菌时,应选择缺乏 能力的酿酒酵母作为受体菌。
(7)将经上述流程培养获得的转基因酿酒酵母接种在含葡萄糖和木糖的培养基中进行酒精发酵能力测试。随着发酵的进行,若该酿酒酵母能够存活,说明它能 ,即说明所需菌株培育成功。
幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:
请回答:
(1)在生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生物的培养基,称做______________。
(2)配制培养基时,要加入尿素和 __________指示剂,这是因为Hp含有___________,它能以尿素作为氮源;若有Hp,则菌落周围会出现____________色环带。
( (3)步骤X表示__________。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液____________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得_______菌落。
(4)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的____________分解为NH3和14CO2。
下列有关微生物实验室培养的叙述,正确的是( )
A.在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊 |
B.灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术 |
C.样品中活菌数量统计时,接种方法应采用划线法 |
D.用平板培养基培养微生物时,应将平板倒过来放置 |
T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒。首先将大肠杆菌放到用含有放射性14C和18O标记的有机物配制的培养基中培养一段时间,然后用未标记的T2噬菌体去感染上述被标记的大肠杆菌。经保温一段时间后,从细菌体内分离出T2噬菌体,则此T2噬菌体的DNA分子和蛋白质分子中能检测到放射性物质的情况是
A.都能检测到14C和18O |
B.只有DNA分子中能检测到14C和18O |
C.都不能检测到14C和18O |
D.DNA分子中只能检测到18O,蛋白质分子中只能检测到14C |
如图表示大肠杆菌细胞中组成核糖体的蛋白质(简称RP)的合成及调控过程。RP基因操纵元是控制核糖体蛋白质合成的DNA分子片段,RBS是核糖体结合位。请回答下列问题:
(1)RP基因操纵元的基本组成单位是______________;①过程发生的场所是______________。
(2)过程②合成的RP1的多肽有一段氨基酸序列为“﹣丝氨酸﹣组氨酸﹣谷氨酸﹣”,转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的相应碱基序列分别为AGA、GUG、CUU,则决定该氨基酸序列的基因的碱基序列为__________。
(3)核糖体主要由______________等物质构成,图中核糖体沿着mRNA的移动依次合成的有关物质是______________等(用图中所示物质表示),当细胞中缺乏rRNA时,RP1与RBS结合,导致RBS被封闭,引起的后果是______________,通过这种调节机制可以避免______________。
(4)大肠杆菌细胞中的RNA,其功能有______________ (多选)。
A.作为遗传物质 B.传递遗传信息 C.转运氨基酸 D.构成核糖体
试题篮
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