在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是
| A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 |
| B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 |
| C．将重组DNA分子导入烟草原生质体 |
| D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 |
科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的 分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是一 ↓GATC—，据图回答：
（1）在构建基因表达载体过程中，应分别用限制性核酸内切酶_________、_________切割质粒、目的基因。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，其结构基础是______。
（2）在过程③一般将受体大肠杆菌用_________处理，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。
（3）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如下图a的结果（黑点表示菌落），能够生长的细菌中已导入了________，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图b的结果（空圈表示与a对照无菌落的位置）。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是________。这些细菌中导入了_________。
下列一般不作为基因工程中的标记基因的是( )
| A．四环素抗性基因 |
| B．绿色荧光蛋白基因 |
| C．产物具有颜色反应的基因 |
| D．贮藏蛋白的基因 |
【生物—选修3：现代生物科技专题】（15 分）阅读下面关于“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：
本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是根据植物“偏爱”的密码子设计，通过人工合成若干DNA 片段，拼接而成。将该基因置于CaMV 35S 启动子和果实专一性启动子2A12 的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。并且在胰岛素-COOH端加上KDEL 内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。
（1）根据上述专利摘要，本发明中所用的人胰岛素基因是采用__________的方法获得，获得的目的基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列_____。（填“相同”或“不同”）
（2）本发明中，转基因操作时所用的载体是__________，载体上的T-DNA可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA 上。构建的基因表达载体中应含有下列哪些结构__________。（多选，填编号）
①终止密码子 ②内含子滞留序列 ③CaMV 35S 启动子 ④果实专一性启动子2A12 ⑤标记基因 ⑥终止子 ⑦引物 ⑧复制原点 ⑨内质网滞留序列 ⑩目的基因
（3）通过农杆菌介导的方法将人胰岛素基因转入番茄中的具体操作是：用含有基因表达载体的农杆菌感染番茄植株的损伤部位，伤口处的番茄植株细胞会分泌大量的__________，吸引农杆菌移向这些细胞。通过农杆菌的________作用，就可以使目的基因进入番茄植株细胞，并将其插入到番茄植株细胞中染色体的DNA上。
（4）请从人体相关生理分析，吃这种转基因番茄能否治疗人类的Ⅰ型糖尿病？________（填“能”或“不能”）。原因是：___________。
构建基因表达载体的四个基本组件是（ ）
| A．复制原点、抗生素基因、内含子、目的基因 |
| B．目的基因、启动子、终止子、标记基因 |
| C．目的基因、内含子、外显子、标记基因 |
| D．荧光基因、复制原点、目的基因、抗生素基因 |
目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是
①检测受体细胞是否有目的基因
②检测受体细胞是否有致病基因
③检测目的基因是否转录
④检测目的基因是否翻译蛋白质
| A．①②③ | B．②③④ |
| C．①③④ | D．①②④ |
天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：
（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ，用 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子 ，以完成工程菌的构建。
（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是 ；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用__________ 检测。
【生物—选修3：现代生物科技专题】治疗性克隆是指把患者体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞中，构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。请回答下列问题：
（1）ES细胞是胚胎干细胞的简称，在形态上，表现为 ：在功能上，具有发育的全能性。将重组胚胎在体外培养到____ 时期，从该时期的___ _中进行分离，从而获得ES细胞。
（2）在培养液中加入 可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞或器官，该过程研究的意义在于解决____问题。
（3）科学家将患者的体细胞核植入去核的卵母细胞中，而不是直接用体细胞进行细胞培养的原因是 。
（4）科学家将体外培养的ES细胞进行诱导使其定向分化为胰岛B细胞，并进行了胰岛素释放实验：控制培养液中___ _的浓度，检测细胞分泌的胰岛素的量，如图为实验结果，据此分析确认ES细胞诱导成功，得到此结论的依据是________。
转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示（①至④代表过程，A至C代表结构或细胞）：
（1）图中①过程用到的酶是 ，所形成的B叫做 ，B是由 、 、 和 等部分组成。
（2）②过程常用 处理农杆菌，使之成为 细胞，利于完成转化过程。
将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是 。
（3）在分子水平上，可采用 的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：
（1）获取外源基因用到的工具酶是 ，为了提高实验成功率，通常利用 技术获得大量标记的外源基因。
（2）外源基因能够整合到精子的 上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的 才能进入卵细胞中。
（3）过程②采用的是 技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行 处理。
（4）过程③需要在 (请写出4点)等条件下进行。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入 。
根据所学知识回答问题：
（1）基因工程中基因表达载体除包括目的基因外，还必须有__________及标记基因等。
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的___________中。植物组织培养的主要原理是植物细胞具有____________，具体过程是在____________和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过____________产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到____________阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项） 。
下图是科学家利用供体生物DNA中的无限增殖调控基因，制备单克隆抗体的过程。下列相关叙述错误的是
| A．经限制酶处理后的目的基因与载体的黏性末端相同 |
| B．Ⅰ是经特定抗原免疫过的B淋巴细胞 |
| C．此种制备单克隆抗体的方法涉及转基因及动物细胞融合技术 |
| D．经检测和筛选后的Ⅱ，既能无限增殖又可分泌单克隆抗体 |
科学家把苏云金杆菌的抗虫基因导入到棉花细胞中，在棉花细胞中抗虫基因经过修饰后得以表达。下列叙述的哪一项不是这一技术的理论依据（ ）
| A．所有生物共用一套遗传密码子 |
| B．基因能控制蛋白质的合成 |
| C．苏云金杆菌的抗虫基因与棉花细胞的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成的 |
| D．苏云金杆菌与棉花有共同的原始祖先 |
科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育了抗枯萎病的金花茶新品种。
（1）将图中“2”连接到“1”上并形成“3”，常用到的酶有____________和____________。
（2）经检测，被图中“3”侵染的金花茶叶片细胞具备了抗病性，这说明“2”已经在金花茶细胞内得到________。该项科技成果在环境保护上的意义是_____________。
（3）将具有抗病基因的金花茶细胞培养成试管苗的过程中，愈伤组织再分化时，除必要的营养供应、激素、适宜的温度和PH值外，还必须给予光照，原因是___________；有的锥形瓶中培养失败还长出很多细菌菌落，其原因是__________。
试题篮
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