质粒是基因工程中最常用的运载体,它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示,通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同,细菌在培养基上的生长情况也不同,下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c),请根据表中提供细菌的生长情况,推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点,正确的一组是( )
|
细菌在含青霉素 培养基上生长情况 |
细菌在含四环素 培养基上生长情况 |
① |
能生长 |
能生长 |
② |
能生长 |
不能生长 |
③ |
不能生长 |
能生长 |
A.①是c;②是b;③是a B.①是a和b;②是a;③是b
C.①是a和b;②是b;③是a D.①是c;②是a;③是b
为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上转运肽的基因相连,导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。
(1)如图,选用图中的限制酶 处理两个基因后再用 酶处理,得到 (填图中字母)端相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的 中,构建 并导入农杆菌中。
(3)将获得的农杆菌接种在含 的固体平板上培养得到单菌落,利用液体培养基震荡培养,得到用于转化的浸染液。
(4)利用 法将目的基因导入油菜叶片中,并通过筛选获得转基因油菜细胞,通过 技术可培育成转基因油菜植株。
科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体,用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答:
(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞,在诱导剂的作用下与________融合,形成____________细胞,并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点在于__________________________,可大量制备。
(2)与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用________________________诱导融合。
(3)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是____________________________。
(4)科学家通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因,然后导入到鼠淋巴细胞中,这个过程中用到的工具酶有________、________,改造抗体属于________工程的范畴。
(14分,每空2分)嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:
Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶
(1)PCR扩增bglB基因时,选用 基因组DNA作模板。
(2)右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。
(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为 。
Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响
(4)据图1、2可知,80℃保温30分钟后,BglB酶会 ;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在 (单选)。
A.50℃ B.60℃ C.70℃ D.80℃
Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。
(5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中 (多选)。
A.仅针对bglB基因进行诱变 B.bglB基因产生了定向突变
C.bglB基因可快速累积突变 D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变
I.(10分)周期性共济失调是一种由常染色体上的基因(用A或a表示)控制的遗传病,致病基因导致细胞膜上正常钙离子通道蛋白结构异常,从而使正常钙离子通道的数量不足,造成细胞功能异常。该致病基因纯合会导致胚胎致死。患者发病的分子机理如题8图所示.请回答:
(1)图中①表示的生理过程是_______,如细胞的_______ (填结构)被破坏,会直接影响图中结构C的形成。
(2)图中所揭示的基因控制性状的方式是_______。
(3)一个患周期性共济失调的女性与正常男性结婚生了一个既患该病又患红绿色盲的孩子(色盲基因用b代表)。这对夫妇中,妻子的基因型是_______,这对夫妇再生一个只患一种病的孩子的概率是_______。
II.(10分)试管婴儿技术是指采用人工方法将卵子与精子从人体内取出并在体外受精,发育成胚胎后,再移植回母体子宫内,以达到受孕目的的一种技术.
(1)顺利受精必须满足两个条件:来自父方的精子要进行_________.来自母方的卵母细胞要_________。
(2)_________(填生物技术)是培育试管婴儿最后一道工序。一般来说,该技术操作比较合适的时期是_________。
(3)PCR技术可用于产前基因诊断,若消耗引物分子14个,则DNA扩增了_________轮。
若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因(1.2 kb),并将之取代质粒pZHZ1(3.7 kb,1 kb=1000对碱基)上相应的EF区域(0.2 kb),形成重组质粒pZHZ2,请据图回答下列问题:
图7-16-1
(1)限制酶E和限制酶F在结构和功能上的不同之处分别在于
①______________________;②______________________。
(2)pZHZ2所含有的碱基对数为________kb。
(3)将重组质粒pZHZ2导入至山羊的受精卵细胞中,若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上,那么获得转基因纯合子山羊的方式是____________________。
(4)上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子,翻译时识别该密码子的tRNA上相应的反密码子碱基序列是________。
试题篮
()