科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育了抗枯萎病的金花茶新品种。
（1）将图中“2”连接到“1”上并形成“3”，常用到的酶有____________和____________。
（2）经检测，被图中“3”侵染的金花茶叶片细胞具备了抗病性，这说明“2”已经在金花茶细胞内得到________。该项科技成果在环境保护上的意义是_____________。
（3）将具有抗病基因的金花茶细胞培养成试管苗的过程中，愈伤组织再分化时，除必要的营养供应、激素、适宜的温度和PH值外，还必须给予光照，原因是___________；有的锥形瓶中培养失败还长出很多细菌菌落，其原因是__________。
下面是将乙肝病毒控制合成的病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
资料1：巴斯德毕赤酵母菌可用培养基中甲醇作为其生活的唯一碳源，同时AOX1基因（醇氧化酶基因）受到诱导而表达，5'AOX1和3'AOXl（TT）是基因AOX1的启动子和终止子，此启动子也能使外源基因高效表达。
资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，下图为科学家改造的pPIC9K质粒，其与目的基因形成的重组质粒在特定部位酶切后形成的重组DNA片段可以整合到酵母菌染色体上，最终实现目的基因的表达。
（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上_________限制酶识别序列（SnaB I、Avr II、SacI、Bgl II四种限制酶的识别序列均不相同），这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
（2）酶切获取HBsA9基因后，需用______________将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，根据步骤②可知步骤①将重组质粒先导入大肠杆菌的目的是______________。
（3）步骤3中应选用限制酶______________来切割从大肠杆菌分离的重组质粒从而获得图中所示的重组DNA片段，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。
（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入______________以便筛选。
（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入______________以维持其生活，同时诱导HBsA9基因表达。
（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行_______并分泌到细胞外，便于提取。
（7）培育转化酵母细胞所利用的遗传学原理是______________。
【生物--选修3现代生物科技专题】人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
（1）过程①代表的过程是 ，过程⑦的实验技术名称是 。
（2）过程③构建出的表达载体必须要含有 、 、 和目的基因等结构。
（3）过程⑥发生的生理过程是 。
（4）生产药物时可用大肠杆菌做受体细胞，那么④应采用 处理，使受体细胞处于 ，从而将表达载体导入受体细胞；药物生产也可用乳腺生物反应器，那么④则应采用 的方法，从而将表达载体导入受体细胞。
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 作疫苗。
（6）实际应用时需要A蛋白具有较好的稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解该蛋白的 ，最终通过改变 ，再通过基因工程得到新的植酸酶。
苏云金杆菌能够形成一种毒性很强的蛋白质晶体，使棉铃虫等害虫瘫痪致死。1993年我国科学家成功培育出抗棉铃虫的转基因抗虫棉，基本流程如图所示。回答下列问题：
（1）苏云金杆菌与棉花在细胞结构方面的统一性体现在哪些方面？ （至少写两方面），培育抗虫棉时的运载体除质粒外，还可以采用____。
（2）培育得到的抗虫棉在产生配子的过程中，两个Bt基因分别移向细胞两极的时期是____。
（3）抗虫棉的推广对环境的保护作用体现在____，但当有科学家提出将Bt基因在粮食、蔬菜作物推广，却遭到强烈反对，最可能的反对理由具体是____。
下列有关基因工程技术的叙述，正确的是 （ ）。
| A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体 |
| B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 |
| C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 |
| D．只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达 |
利用基因工程手段将Myc和Ras两种癌基因导入小鼠体内，检测转基因小鼠的癌症发病率，结果如下图所示。研究同时发现，乳腺和唾液腺的癌变率较高。结合图示结果分析下列说法正确的是
| A．可用农杆菌转化法将癌基因导入小鼠体内 |
| B．两种癌基因共同作用使细胞更易发生癌变 |
| C．只要有Myc或Ras基因，细胞就会癌变 |
| D．Myc和Ras基因的表达没有组织特异性 |
构建重组质粒时可选用四种限制酶，其识别序列如下图。为防止酶切片段的自身环接，不可选用的限制酶组合是
| A．①② | B．②③ | C．①④ | D．③④ |
如图表示一项重要生物技术的关键步骤，X是获得外源基因并能够表达的细胞。下列说法不正确的是
| A．X是能合成人胰岛素的细胞 |
| B．质粒通常有标记基因和多个限制酶切点 |
| C．基因与载体的重组只需要DNA连接酶 |
| D．该受体细胞的性状被定向改造 |
内皮素（ET）是一种多肽,主要通过与靶细胞膜上的ET受体（ETA）结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体，实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达，其过程如下图所示，
图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为
，限制酶XhoⅠ的识别序列为
。请据图分析回答：
（1）进行过程①时，需要加入缓冲液、引物、dNTP和___________酶等。完成过程①②③的目的是
___________。
（2）过程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使___________键断开，形成的黏性末端是___________。
（3）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子是___________的部位，进而可驱动基因的转录。除图中已标出的结构外，基因表达载体还应具有的结构是___________。
（4）过程⑥要用CaCl2预先处理大肠杆菌，使其成为容易吸收外界DNA的___________细胞。
（5）将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因，其目的是有利于检测___________。
下列各项生物技术中，理论上对遗传信息改变最小的是
| A．经细胞核移植克隆动物 |
| B．导入外源基因培育转基因动物 |
| C．经植物组织培养克隆植物 |
| D．植物体细胞杂交获得杂种植株 |
下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是
| A．表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 |
| B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原点 |
| C．借助标记基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 |
| D．启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 |
科学家将人体细胞中控制合成胰岛素的一段DNA提取出来，转移到大肠杆菌细胞内的DNA分子上，结果该大肠杆菌合成了人的胰岛素，下列相关叙述中不正确的是
| A．人和大肠杆菌的遗传信息都贮存在DNA分子中 |
| B．大肠杆菌的生命活动所需的能量主要由线粒体提供 |
| C．大肠杆菌细胞内含量较多,且主要承担其生命活动的物质是蛋白质 |
| D．该项技术能为糖尿病患者带来好处 |
人类在预防与诊疗传染性疾病的过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，疫苗生产和抗体制备的部分流程如下图：
（1）过程①代表的是____________。
（2）过程③构建A基因重组载体时，必须使用限制性核酸内切酶和____________两种工具酶。由过程③构建A基因重组载体，其组成除了目的基因外，还必须有启动子、终止子、_________以及复制原点等。
（3）过程④要检测A基因是否进入受体细胞，常用的方法是________________法；要检测A基因在受体细胞内是否翻译出蛋白质，需用________________法。
（4）与血清抗体相比，单克隆抗体突出的优点是______________，并能大量制备。
（5）单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的_____________和____________两大技术。
（6）单克隆抗体的制备过程中，两次筛选的目的不同，其中第二次筛选的目的是筛选出______。筛选时所用的培养基是特定的_______________培养基。
（7）举例说出基因工程培育转基因植物的过程中，微生物能起到的重要作用有 、 。
在基因工程中，限制酶主要用于
| A．目的基因的提取和导入 |
| B．目的基因的导入和检测 |
| C．目的基因与运载体结合和导入 |
| D．目的基因的提取和与运载体结合 |
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