请回答下列关于转基因抗虫棉的相关问题：
（1）从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具是 ，它能够识别双链DNA分子的某种 ，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的 键断开。
（2）培育过程中构建的重组DNA分子包括复制原点、目的基因、标记基因、终止子和 。
（3）若检测目的基因是否插入到受体细胞的DNA上，方法是 ；若检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质，方法是 。
（4）将已导入目的基因的棉花细胞培育成幼苗，需经过 和 两个过程。
在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值。右图所示是获得转基因莴苣的技术流程，请据图回答下列问题：
（1）获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和________。
（2）①过程需要的酶有________、________。
（3）重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外，还必须含有启动子、终止子和________，这样才能构成一个完整的基因表达载体。
（4）如果受体细胞C1是土壤农杆菌，则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的________，使目的基因进入受体细胞C2，并将其插入到受体细胞C2中________上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴苣。经②过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达，在分子水平上可用________法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因莴苣培育成功。
关于下图所示DNA分子的说法，正确的是
| A．限制酶作用于①部位，DNA连接酶作用于③部位 |
B．该DNA的特异性表现在碱基种类和 的比例上 |
C．若该DNA中A为p个，占全部碱基的 （m>2n），则G的个数为 －p |
D．把该DNA放在含15N的培养液中复制两代，子代中含15N的DNA占 |
“试管婴儿技术”不仅使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会，也为人类的优生优育开辟了新的途径。据此回答：
（1）在体外受精时，精子首先要进行________处理；卵细胞则要培养到_________ （时期）才能与精子结合。
（2）采用__________________技术，能得到“同卵双胞胎”。
（3）如果滥用试管婴儿技术设计婴儿性别，将会破坏人类正常的_______。
（4）要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，科学家将________和乳腺蛋白基因的_______、终止子等重组在一起，通过显微注射等方法导入牛的受精卵中。
（5）动物细胞工程中，重组细胞在体外培养时，培养液中除了加入诱导物外，还应加入水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸、 _等物质，恒温箱中加入CO2的作用是___________
慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白，人就容易出现浮肿。人体的自蛋白正常值在每100mL血液中含有3.8～4.8g，如果比正常值低很多时就需要注射人体白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
（1）要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用______________处理，采集的卵母细胞必须发育到_________期，才能与获能的精子受精。
（2）要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、_______________、_______________、_______________、标记基因等部分。
（3）在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是_________________。
（4）对移植前的胚胎进行性别鉴定选择__________（性别）胚胎进行移植。
中国科学家利用转基因技术培育出了高品质的奶牛，其牛奶中含有某种有利于人体心脏健康的脂肪酸。请回答与此转基因奶牛培育过程中的相关问题：
（1）基因工程的核心步骤是______________，其中_______位于基因的首端，是________识别和结合的部位。将目的基因导入受精卵的最常用方法是_____________。
（2）通常用激素处理代孕母奶牛和供体母奶牛，使其生理条件达到同步，称为__________处理。配种或人工授精后，用特殊的装置把供体母奶牛子宫内的胚胎冲洗出来，称为__________。
（3）早期胚胎培养的培养液中除了各种无机盐、有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还需要添加激素和________。胚胎发育到_________或囊胚阶段即可移植。
如图表示某哺乳动物形成卵子及早期胚胎的过程（N表示染色体组）。下列有关叙述错误的是
| A．次级卵母细胞形成的过程需要激素调节 |
| B．卵子的形成过程在时间上具有连续性 |
| C．Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ细胞分裂后期染色体组数不相同 |
| D．培育转基因动物通常选择细胞Ⅳ作为受体细胞 |
用某人的胰岛素基因制成的DNA探针，检测下列物质，能形成杂交分子的是
①该人胰岛A细胞中的DNA ②该人胰岛B细胞的mRNA
③该人胰岛A细胞的mRNA ④该人肝细胞的DNA
| A．①②③④ | B．①②③ | C．①②④ | D．② |
下列关于限制酶和DNA连接酶的理解，正确的是
| A．其化学本质都是蛋白质 |
| B．DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键 |
| C．它们不能被反复使用 |
| D．在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶 |
(10分)请回答下列有关基因工程的问题。
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点。图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
（1）从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是__________________，基因工程中还可以用_______________作为运载体。
（2）图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_______________
（3）下图是用______________(限制）酶进行切割得到的目的基因。可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化。
（4）人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。该基因含有800对碱基对(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,．用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp．而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp．在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有________个和_____个，患者体内发生了_________。
（5）下列有关基因工程的叙述错误的是（ ）（多选）
A．质粒上的目的基因必须整合到受体细胞的DNA上才能不被分解
B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
C．没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞
下列一般不作为基因工程中的标记基因的是( )
| A．四环素抗性基因 |
| B．绿色荧光蛋白基因 |
| C．产物具有颜色反应的基因 |
| D．贮藏蛋白的基因 |
植酸酶，是酶的品种之一，在动物饲料加丁中发挥重要作用。植酸酶能分离出植酸分子中的磷，将植酸（盐）降解为肌醇和无机磷，同时释放出与植酸（盐）结合的其它营养物质。
（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的__ __，最终通过改变植酸酶的__ __，再通过基因工程得到新的植酸酶。
（2）培育转植酸酶基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞最常用的方法是_ ___。
（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过方法转入猪的 中。将早期胚胎培养至一定时期通过 方法，从而一次得到多个转基因猪个体。
（4）若这些转基因植物被推广种植，可能会对生态环境产生怎样的影响？ 。
下图是培育试管牛的过程，请回答。
（1）从良种母牛采集卵母细胞后，用____________激素处理卵细胞，使其排出更多的卵子；从良种公牛采集的精子需__________后才能进行受精作用。
（2）在体外培养受精卵时，除了给予适量O2维持细胞呼吸外，还需要提供____气体以维持培养液的______。
（3）图中过程A称为________，在此之前可以采用______________技术获得同卵双胎或多胎。
（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的基因导人牛受精卵，最常用的导人方法是_____________，获得转基因母牛后，如果牛奶中_________________________，即说明目的基因已经表达。
天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：
（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ，用 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子 ，以完成工程菌的构建。
（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是 ；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用__________ 检测。
试题篮
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