下图表示利用现代生物技术生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：
(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有____________、______________和蛋白质工程。
(2)蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原因是____________________________。
(3)图中A、B分别表示___________________________、___________________。
(4)为提高培育成功率，进行②过程之前，对受体动物的处理是用______________进行同期发情处理，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行______________检测。
下图表示用转基因鼠的制备过程，据图回答。
（1）外源目的基因导入原核时期受精卵的原核中常用方法是_______________，使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用需要_________________。
（2）受精卵可以从供体母鼠体内获得，也可以通过体外受精获得：
①若受精卵细胞从供体母鼠体内获得，其基本过程是：首先对供体母鼠用促性腺激素进行_________处理，再通过自然交配或___________完成受精，最后从供体母鼠输卵管中获得受精卵细胞。
②若受精卵通过体外受精，基本操作过程包括__________、__________和受精。
（3）受精卵经过体外培养，形成___________，再移植到代孕母鼠体内。幼鼠发生断乳后自尾部DNA，与__________作分子杂交，鉴定外源基因是否整合,有整合的鼠称为嵌合鼠。将带有外源基因的嵌合鼠小鼠与未经转基因的小鼠杂交、筛选后，可得到纯合转基因小鼠。
[生物——选修3:现代生物科技专题](15分)
生物科学技术发展日新月异,既解决了一些社会需求,同时也带来了一些社会忧虑。据此回答下列问题:
(1)基因工程中,构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于下图中的 (填“a”或“b”)处,限制酶不能切割自身DNA的原因是 ;用PCR扩增技术获取目的基因依据的原理是 。 
(2)植物体细胞杂交过程的一个关键步骤是借用一定的技术手段人工诱导 ;动物细胞培养中,使用胰蛋白酶处理动物组织的目的是 。
(3)受精卵发育过程中,滋养层将发育成为 ;试管婴儿技术为人类优生开辟了新途径,大多数人反对设计婴儿性别的原因是 。
(4)“无废弃物农业”是我国古代传统农业的辉煌成就之一,这体现了生态工程的 原理。
[生物——选修3：现代生物科技专题]回答以下关于基因工程和胚胎工程的相关问题：
(1)基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性。利用基因工程等技术培育转基因生物时，基因工程的四步骤如下：
第一步：目的基因的获取。获取方法有_____________________________（写出两种即可）。
第二步：基因表达载体的构建。该步骤常用的工具酶是________。完整的重组载体应具备________种特殊DNA片段。
第三步：将目的基因导人受体细胞。如受体细胞为动物的________，则常用的方法是显微注射法；如受体细胞为微生物细胞，则用________处理细胞，使其处于感受态，然后在一定温度下重组表达载体与缓冲液混合完成转化。
第四步：________________________。
(2)胚胎工程主要是对哺乳动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育，获得人们所需要的成体动物的新技术。
①体外受精：对精子进行获能处理的方法有________。获能的精子与成熟的卵子需在________中完成受精作用。
②早起胚胎的发育：受精卵不断增殖的过程，细胞分化最先出现在____期。
③胚胎移植：适合移植的胚胎是________________________。
请回答下列有关胚胎工程和基因工程方面的问题：
（1）目前，科学家通过细胞核移植实验，培育出多种哺乳动物新类型。在哺乳动物的核移植实验中，一般通过____________（物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到_____________阶段时，将胚胎植入同种的、__________相同的另一雌性（代孕）动物体内。
（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行_____处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至_____________，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。
（3）利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是_______________。
（4）若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因的启动子、________________、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的_______________（填“受精卵”或“乳腺细胞”），导入方法是_______________。
2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
（1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来 ，理由是： 。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是 。
（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是 。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用数字表示）。①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。
如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程图解，请据图回答：
（1）图中所涉及的现代生物技术有细胞核移植、 、基因工程和动物细胞培养技术等。
（2）图中①结构表示 ；选择 （时期）的卵母细胞去核后作为受体细胞构建重组细胞A。②所示的细胞是 。
（3）将健康胰岛B细胞基因导入②之前要构建 ，其组成除含目的基因外，还必须含有启动子、终止子、标记基因和 ，这是基因工程的核心。
（4）重组细胞B在一定的细胞分化诱导剂作用下，可以定向分化形成具有正常胰岛B细胞功能的胰岛样细胞，其根本原因是 。通常还要在培养重组细胞B的培养液中添加一定量的_________，以防培养过程中的污染。
(5)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是 。
2011年9月，中国女科学家屠呦呦等因发现能有效治疗疟疾的青蒿素而获得了国际医学界著名的“拉斯克奖”。但是青蒿中青蒿素的含量很低，且受地域性种植影响较大。研究人员已经弄清了青蒿细胞中青蒿素的合成途径（如图实线框内所示），并且发现酵母细胞也能够产生青蒿素合成的中间产物FPP（如图虚线框内所示）。请回答问题：
（1）在FPP合成酶基因表达过程中，完成过程①需要 酶催化，完成过程②需要的物质有 、 、 等，结构有 。
（2）根据图示代谢过程，科学家在设计培育能生产青蒿素的酵母细胞过程中，需要向酵母细胞中导入 、 等基因。
（3）实验发现，酵母细胞导入相关基因后，这些基因能正常表达，但酵母合成的青蒿素仍很少，根据图解分析原因可能是 ，为提高酵母菌合成的青蒿素的产量，请提出一个合理的思路 。
（4）利用酵母细胞生产青蒿素与从植物体内直接提取相比较，明显的优势有 、 、 等。
阅读如下资料：
资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”。
资料乙：科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。
回答下列问题：
（1）资料甲属于基因工程的范畴。构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生________(相同、不同)黏性末端的限制酶。
（2）构建的表达载体含有牛生长激素基因及其启动子等，其中启动子的作用是___________。将基因表达载体导入小鼠受精卵内常用 法。
（3）资料乙属于基因工程和细胞工程的范畴。鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与________融合，形成____________细胞，并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于_____________，可大量制备。
（4）与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用__________诱导融合。
1978年，人类首次利用转基因技术生产人胰岛素，其过程大致如图所示：
（1）人胰岛素由A、B两条肽链组成，可根据组成肽链的氨基酸序列，确定编码胰岛素基因的碱基序列，因此可通过_______方法获得目的基因。
(2)β-半乳糖苷酶能将无色0NPG分解，产物呈黄色，本生产流程中β-半乳糖苷酶基因作为_______，通过①和②，完成基因表达载体的构建，写出该过程处理DNA分子所需要的酶：_______
（3）③表示将表达载体导入受体细胞，用Ca2+处理大肠杆菌，目的是使之变为_______细胞，利于外源DNA侵染，④表示利用化学方法催化二硫键的形成，合成具有生物活性的胰岛素，人体内该过程在胰岛B细胞的_______中进行。
我国科技人员历经多年，成功培育出一批人乳铁蛋白转基因奶牛，其牛奶中的重组人乳铁蛋白含量在国际上是最高的，转基因奶牛培育过程如图所示，据图回答下列问题。
（1）转基因过程用到的工具酶有 ；含目的基因的载体除包括目的基因外，还必须有
及标记基因等；方法C是 技术。
（2）精子体外获能通常采用培养法和 两种方法。
（3）图中的A和B分别表示 过程，A中的培养液除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、 等营养成分，以及血清等物质。
（4）如果想同时获得更多的相同子代，可采用 技术，若对囊胚操作，应注意 。
[生物——现代生物科技专题]
转基因抗虫棉是人们应用较早的基因重组技术推广项目，目前转基因技术有了新的改进，如下图所示，请根据所学知识回答：
(1)图中转基因过程通常选择的限制酶是_______________，启动子的作用是与_______识别和结合，从而驱动基因的转录过程。目的基因与载体结合主要依靠二者含有共同的______
(2)需要进行离体组织培养的过程是______(用标号)。由棉株1获得单倍体苗的途径为：花粉通过诱导首先形成________进而再分化为试管苗。一般试管苗的形成，先诱导生成__________(“从芽”或“根”），说明原因________________。
(3)棉株l、2、3中各随机取出一个叶肉细胞，其细胞核中含有目的基因个数分别为_____。
[生物——选修3：现代生物科学技术]家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。
（1）进行转基因操作前，需用________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_______和________之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的方法有 、 。
（3）通过PCR技术可大量获取目的基因。PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和______________。
（4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的_____________原理。同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的__________原理。
[生物——选修3：现代生物科技专题]
2011年，科学家将蜘蛛的相关基因导入山羊体内，创造出转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。利用这种蛛丝蛋白制造的蛛丝纤维具有很高的强度和伸缩性。可制成防弹背心、降落伞绳等。下面是生产原理图，请回答问题：
（1）在①过程中用到的酶是 ，在②过程中用到的酶是 。
（2）将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是 。如果导入的受体细胞为体细胞，则③过程需要的技术操作是 ，重组细胞才具有发育的全能性。
（3）④过程所用的胚胎工程技术是 ，该过程所用培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和 等。
（4）进行⑤过程需要的技术操作是 ，最佳时期是 。
（5）进行⑥过程时，需要对供、受体母羊进行选择，并 处理。
【现代生物技术——选修Ⅲ】（15分，除标注外每空1分）为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用____________法，从陆地棉基因文库中获取酶D基因.从拟南芥基因文库中获取转运肽基因.所含三种限制酶(Cla I、Sac I、Xba I)的切点如下图所示。则用______________和_____________酶处理两个基因后，可得到____________ (填图中字母)端相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入右上图所示质粒的T-DNA中.构建____________，并导入农杆菌中.将获得的农杆菌接种在含____________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液.
(3)剪取油菜的叶片放入染液中一段时间后筛选获得转获因油菜细胞.该细胞通过____________技术.可培育成转基因油菜植株。
(4)提取上述转基因油菜的mRNA.在逆转录酶的作用下获得cDNA.再依据______的DNA片段设计引物进行扩增.对扩增结果进行检侧.可判断融合基因是否完成 。
(5)用_______________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达.
试题篮
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