很久以前科学家在土壤中发现了某种细菌能制造一种对昆虫有毒的蛋白质，当时许多人就想把编码这一蛋白质的基因(抗虫基因)转移到农作物中，以降低昆虫对农作物造成的危害。20世纪90年代，美国科学家采用基因工程技术首次培育出抗虫玉米新品种。下图为这一转基因玉米的主要培育过程。
（1）获得特定目的基因的途径除了从该细菌中直接分离抗虫基因外，还可以______。将目的基因与载体结合时必须用同种限制酶和 。在基因工程中，常用的载体有_____________等，而作为载体必须具备相应的条件，例如应具有_____________以便进行筛选。
（2）由转基因玉米细胞经过_____________形成愈伤组织，然后发育成胚状体和试管苗。若要制备转基因玉米的人工种子，可选择上述实验过程中的_____________再包裹合适的_____________等。
在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答：
（1）A过程需要的酶有_______________________________________________。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是；
____________________________________________________________。
（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________
________________________________________________作为探针。
（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与_________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。
(9分)回答下列有关生物工程的问题。
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点；图2是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
1．图1是用限制酶_________________进行切割得到的目的基因，可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后____。
2．从图2中反映质粒作为运载体的特点是___________________。基因工程中还可以用___________________作为运载体。
3．图2中构建重组质粒不能使用SmaI酶切割的原因是 ________________。
4．图2中④表示组织培养过程中的________，它对植物激素调节的要求是______________。
5．图2中的农杆菌是基因工程中的________________。判断该转基因工程是否成功的依据是_________。
(8分)应用生物工程技术可获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：
(1)在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是 ，②过程常用的方法是 。
(2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有 。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用 技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是 细胞，Ⅲ代表的细胞具有 的特点。
(4)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是 ，⑤过程采用的技术是 。
(8分)右图表示用显微注射法导入目的基因获得转基因鼠的过程，据图回答。
(1)培育转基因哺乳动物时，与用早期胚胎细胞相比较，受精卵的优势是 。
(2)受精卵可以从供体母鼠体内获得，也可以通过体外受精获取。
①若受精卵细胞从供体母鼠体内获得，其基本过程是：首先对供体母鼠用促性腺激素进行
处理，再通过自然交配或 完成受精，最后从供体母鼠输卵管中获得受精卵。
②若受精卵在体外通过体外受精获得，其基本操作过程包括 、 和受精。
(3)过程Ⅲ表示受精卵经过体外培养，形成早期胚胎，再移植到受体母鼠体内。培养过程中，培养液添加一定量的 ，以防止杂菌污染；在含有5%CO2的培养箱中进行培养，CO2的主要作用是 。
(4)用显微注射技术将目的基因导入受体细胞，需要构建 ，目的是
。
在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答：
（1）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。
（2）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________
___________________________________作为探针。
（3）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是_____________________。
（4）将重组质粒导入土壤农杆菌时要用 处理，处理后细胞称为 ，构建重组质粒之后仍然用农杆菌侵染，原因是 。
(14分) 2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。右图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
(1) ④过程应用的主要生物技术是 。
(2) 杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于 工程技术范畴。
(3) 组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入____________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的 基因（填符号），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于___________的准确插入。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是 。
(4) 若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为
，则该酶识别的核苷酸序列是 。
图1表示含有目的基因的
片段长度（
即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有
Ⅰ、
Ⅰ、
Ⅰ、
Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为
。请回答下列问题：
（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。
（2）若用限制酶 Ⅰ完全切割图1中
片段，产生的末端是末端，其产物长度为。
（3）若图1中虚线方框内的碱基对被碱基对替换，那么基因
就突变为基因
。从杂合子分离出图1及其对应的
片段，用限制酶
Ⅰ完全切割，产物中共有种不同
片段。
（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是。
肺细胞中的-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将
-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图１。
请回答：
（１）进行过程①时，需用酶切开载体以插入-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动
-7基因转录，该部位称为。
（２）进行过程②时，需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
（３）研究发现，-7基因能影响
的表达，其影响机理如图２。据图分析，可从细胞提取进行分子杂交，以直接检测
-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中（
蛋白）含量减少引起的。
毛角蛋白Ⅱ型中间丝（Ⅱ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转
Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
（1）过程①中最常用的运载工具是，所需要的酶是限制酶和。
（2）在过程②中，用处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞至于5％的气体环境中，
的作用是。
（3）在过程③中，用处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行处理。
从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是。在胚胎移植前，通过技术可获得较多胚胎。
下图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图，据图回答：
（1）随着科技发展，获取目的基因的方法也越来越多，若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的，该方法称为_______________________________。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比，该过程不需要________酶。③是在_____________________（填“酶的名称”）作用下进行延伸的。
（2）在培养转基因植物的研究中，卡那酶素抗性基因常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生活。乙图为获得抗虫棉技术的流程，A过程需要的酶有_____________、________________。图中将目的基因导入植物体细胞采用的方法是_________________________。C过程的培养基除含有必要营养物质，琼脂和激素外，还必须加入___________________。
（3）离体棉花叶片组织C、D、E成功地培育出转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是_________________________。该技术的原理是____________________________。
（4）检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用____________________________，与提取出的_________做分子杂交。
（5）科学家将植物细胞培养到__________，包上人工种皮，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养。
如图所示为一种限制酶切割DNA分子的过程，请据图回答下列问题：
（1）这种限制酶的切点在___________________ ___________________ 之间。
（2）这种限制酶的特点是______________________________________________ 。
（3）如果是G碱基发生基因突变，可能发生的情况是___________________ ___。
（4）这种酶产要在存在于_________________中。
（5）若用该酶从苏云金芽孢杆菌中提取到了抗虫基因，要将该基因导入棉花细胞中获得抗虫棉，则所需运载工具是__________，最常用的是__________，另外还有______________________。和___________ 该运输工具具有的特点是：有多个______________________；在受体细胞内可进行________________；具有特殊的____________________。
下图为某转基因小鼠培育过程示意图，①～⑦表示相关过程。请回答：
（1）过程①注射的A物质是 ，目的是使供体母鼠 。
（2）过程③把目的基因和运载体连接需要在 的催化下完成，过程④常用的方法是 。
（3）蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是 。为获得较多基因组成相同的转基因小鼠，常采用 的方法。
请回答有关下图的问题：
（1）图中①～⑤所示的生物工程为 。该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过对 的修饰或合成，对现有的进行改造，或制造出一种新的 ，以满足人类生活的需求。
（2）图中序号④所示过程叫做 ，该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是 （请将模板碱基写在前）
（3）若大量扩增目的基因，则用的是 技术（写出全称），该过程需要的聚合酶的特点是 。
（4）若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，在图中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体 的精子。
（5）为获得较多的受精卵进行研究，图中⑥过程一般用激素对供体做 处理。为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对 动物做 处理。若图中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养到 期方能受精。
（6）用胚胎分割技术处理发育到 期或囊胚期的早期胚胎，可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理，要注意将 均等分割。
应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：
（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，②过程常用的方法是___________________。
（2）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是___________细胞，Ⅲ代表的细胞所分泌的物质具有________________________的特点。
（3）在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是____________________，⑤过程采用的技术是___________。
（4）下面是获取目的基因的几种方法，其中需要模板的是（ ）
①从基因组文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因
③构建cDNA文库 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因
| A．①② | B．②③ | C．①③ | D．①④ |
试题篮
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