限制性核酸内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切,不同的限制性核酸内切酶可以对不
同的核酸序列进行剪切。现用3种不同的限制性核酸内切酶对一6.2 kb (千碱基对)大小的线状DNA进行剪切后,用凝胶电泳分离各核酸片段,实验结果见下表。 请问:3种不同的限制性核酸内切酶在此DNA片段上的切点位置是图中的 
(I)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答
(1) 检测尿糖可以使用的试剂是 。该图提取目的基因的方法
为 法，B的化学本质是 ，从B到C需要的酶有 。D细胞一般选用大肠杆菌等微生物，为使过程⑧更易进行，可用 处理D的细胞。
(2)用某人的胰岛素基因制成的单链DNA探针，检测下列物质，能形成杂交分子的是
①该人胰岛A细胞中的DNA（
经处理成单链） ②该人胰岛B细胞的mRNA
③该人胰岛A细胞的mRNA ④该人肝细胞中的DNA（经处理成单链）
| A．①②③④ | B．①②③ | C．①②④ | D．② |
(3)下图是分别用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。
（4）若甲细胞表示胰岛A细胞，则乙细胞最可能是 细胞。在人体血糖偏低的情况下，乙细胞内会加快的代谢活动是 。
（II）牛的乳汁中还含有免疫球蛋白，初生牛犊能够通过初乳从母体获得这种免疫.所谓初乳,即母牛分娩后5-7天内的产生的乳,与常乳比较其特点主要是:免疫球蛋白比常乳高20-25倍.试回答如下问题：
（1）免疫球蛋白在免疫学中又被称为________,极少数人服用初乳后出现过敏反应,初乳与吸附在某些细胞表面的抗体结合后，这些细胞释放 ，导致过敏现象发生。
（2）牛是二倍体生物，体细胞中有30对染色体，其中有一对是性染色体，若要对牛的基因组进行测序，应至少测定 个染色体DNA的碱基对的排列顺序。
（3）牛乳的乳脂率属于细胞质遗传还是细胞核遗传，通常用 实验方法来鉴别。
回答下列有关基因工程的问题。
（1）．基因工程中使用的限制酶，其特点是 。
下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。
（2）．将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有 。（可多选）
| A．X－1 | B．X－2 | C．X－3 | D．X－4 |
（3）．若将上图所示X－1、X－2、X－3、X－4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有 。
（4）．如果X－1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒X－2（Tcr基因的长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为 对碱基。
（5）．若将外源的Tcr基因两端用E2切开，再与用E2切开的X－1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X－4的细胞数与含X－1的细胞数之比为13，增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？ 。原因是 。
pBR322质粒是基因工程中经常选用的工具，如图Ⅰ所示。
I．目的基因如果插入质粒的某抗性基因中，将使该基因失活。为了检查运载体是否导入原本无Ampr和Tetr的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图Ⅱ的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图Ⅲ的结果（空圈表示与Ⅱ对照无菌落的位置）。
（1）．pBR322质粒在基因工程中的作用是 。
（2）．下图是pBR322质粒上被某种酶识别的一段特定序列。a处被切割后，产生的暴露出来的单链碱基序列是 。如果要从生物细胞中分离目的基因，首先需要进行基因定位，然后再用上述酶切割。将目的基因与质粒连接起来的酶作用于图中的 处。
（3）与图Ⅲ空圈相对应的图Ⅱ中的菌落表现型是 ，由此说明目的基因插入了 中。
II．下面是pBR322质粒的部分碱基序列，所编码蛋白质的氨基酸序列为“甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—缬氨酸…”（甲硫氨酸的密码子AUG也是起始密码子）。
则：①、②两单链作为转录模板链的是 （填序号），该链转录产生的mRNA顺序是AUG ；如图中箭头所指碱基对G/C缺失，该基因相应片段编码的氨基酸序列为
（ 4分）。
如下图是某种动物蛋白质工程的示意图，请分析回答
（1）目前蛋白质工程中难度最大的是图中编号 所示的过程，蛋白质工程的目标是设计蛋白质分子，但最终还是要通过 来完成。
（2）若相关蛋白质的核酸片段是从细胞质中获取的mRNA，则④过程包括 、 。
（3）⑤过程中对核苷酸序列有严格要求的工具酶是 ，基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有 、终止子和 。
（4）实验室常用PCR技术，该技术是利用 原理来扩增目的基因片段，使其数量呈指数方式增加。PCR技术所用的工具酶是 。
（5）目的基因进入受体细胞，并在细胞内维持稳定和表达的过程，称为 。将基因表达载体导入大肠杆菌时，常用 处理大肠杆菌，以利于基因表达载体进入大肠杆菌。
（6）为了检测进入受体细胞的胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用放射性同位素标记的
作探针与mRNA杂交，为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素，常用 技术。
（7）若图中雄性动物为牛、羊等家畜，则⑦采集精子后，需采用⑨ 法诱导精子 。
人体细胞内含有抑制癌症发生的P53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。
（1）目的基因的获取方法通常包括____和 。
（2）上图表示从正常人和患者体内获取的P53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的改变如图所示，这种变异被称为____。
（3）已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P53基因部分区域（见上图），那么正常人的会被切成____个片段，而患者的则被切割成为____个片段。
（4）如果某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现4种片段，那么该人的基因型是____（以R表示正常基因，r表示异常基因）。
下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？ 为什么？
。
（2）②过程必需的酶是 酶，通过②过程获得的基因与人的胰岛屿细胞的中胰岛素基因有何不同
(3)图中过程③④⑤是 技术，过程③除了用解旋酶还可以用什么方法 。通过⑤过程获取目的基因的前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成 。
（4）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。
（5）通过⑩过程产生的人胰岛素与细胞中的哪种细胞器有关 。
[生物一一一选修3：现代生物科技专题]
绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和鲴织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。
（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶足③过程需要的酶是____．
（2）④过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。
（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用__________技术进行检测。
（4）图中猪的卵母细胞应处于________期，此时在显微镜下可观察到在卵黄膜和透明带之间有__________个极体。用于核移植的导入了基因表达载体的猪胎儿成纤维细胞一般都选用传代10代以内的细胞的原因是__________。
（5）由重组细胞培育得到绿色荧光转基因克隆猪过程中涉及到的现代生物技术手段有__________，生殖方式为__________。
（6）假如该过程得到了一个早期胚胎，为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法，分割时应选择__________或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意__________。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用__________处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。
基因疫苗是将编码病原体蛋白的基因插到质粒上，然后将之导入人或动物体内，让其在宿主细胞求表达，诱导机体产生免疫应答。其主要机制如下图9：
据图回答有关问题：
(1) 接种基因疫苗后，目的基因经过 和 指导合成的病原体蛋白将作为 刺激人体，产生初次免疫。
(2) 构建重组质粒需要用到的酶有 ___ _ ；细胞⑦的作用是 。
(3) 细胞③的功能是 。
(4) 与初次免疫比较，当机体再次接触抗原时免疫的特点是 ， 这与 （填图中的编号）有关。
目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示。
(1)构建人工质粒时要有抗性基因，以便于________。观察上图，如果A为质粒，则C表示 。
(2)pBR322分子中有单个EcoRⅠ限制酶作用位点，EcoRⅠ只能识别序列—GAATTC—，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。
_______________________________________________________________________
(3)pBR322分子中另有单个的BamHⅠ限制酶作用位点，现将经BamHⅠ处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因，通过____________作用恢复________________________键，成功地获得了重组质粒。能形成重组质粒的原因是_______________________________________________________________________
(4) 作为受体大肠杆菌应不含_______________________，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是_______，图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是______________。
（5）基因工程中使用的限制酶，其特点是_______________________，下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。
将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有＿＿＿。（可多选）
| A．X－1 | B．X－2 | C．X－3 | D．X－4 |
(7分)人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此基因的变化进行检测。
（1）检测基因前要通过PCR进行DNA的扩增。PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为_____________________________________________________________________。
（2）下图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对；这种变异被称为___________________。
（3）已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成______个片段；而患者的则被切割成长度为______对碱基和______对碱基的两种片段。
（4）如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是________(以P+表示正常基因，P-表示异常基因。
回答有关“试管婴儿”的问题：
(1) “试管婴儿”在生物学上所依据的原理是
| A．有性生殖 | B．组织培养 | C．克隆技术 | D．基因工程 |
(2)“试管婴儿”的形成用到下列哪些技术？（填序号）__________ 。
①体外培养 ②人工授精 ③胚胎移植 ④核移植
(3)要得到“同卵双胞胎”，采用的技术有_______。
(4)在核移植过程中，供体细胞一般选用传代到________代以内的转基因体细胞，原因是______________________________________________________。
(5)现在大多数人反对设计婴儿性别，其原因是________________________ 。
(6)体细胞核移植生产的多利和试管婴儿的过程中是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？
_______________________________________________________________________
(7)试管婴儿的核遗传物质来自一父二母。这种说法对吗？为什么？
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的
番茄新品种。操作流程如图，请回答：
(1)在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法最可能叫做
(2)从图中可见，mRNAl和mRNA2的结合直接导致了 无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。
(3)普通番茄细胞导入目的基因后，经③过程形成 ，然后诱导出试管苗，进一步培养成正常植株。
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（1）.用来治疗糖尿病的胰岛素，过去主要靠从动物体器官、组织中提取，但因受原料限制，无法推广。现在，可以用发酵工程的方法来生产胰岛素。若用大肠杆菌发酵来生产胰岛素，并结合基因工程，下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
①能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？ ，为什么？
。
②过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶是 酶。
③若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶 个。
④在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产生 ，再加入 ，才可形成C。
⑤为使过程⑧更易进行，可用 （试剂）处理D。以增大 的通透性，让重组DNA进人大肠杆菌体内。
(2)从概念上分析，这种基因重组与孟德尔基因自由组合所产生的基因重组有何不同?
(至少两个方面)。
（3）有人提出“吃基因补基因”，你是否赞成这种观点，试从新陈代谢的角度简要说明理由：
基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展运用。基因工程基本操作流程如下图，
请据图分析回答：
（1）图中A是 ；在基因工程中，需要在 ＿＿＿＿＿酶的作用下才能完成剪接过程。
（2）在上述基因工程的操作过程中，可以遵循碱基互补配对原则的步骤有 。（用图解中序号表示
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）
（3）不同种生物之间的基因移植成功，从分子水平分析，进行基因工程的主要理论依据是 ，也说明了生物共用一套 。
（4）研究中发现，番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用，导致害虫无法消化食物而被杀死，人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内，玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，玉米这种变异的来源是 。
（5）科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上，经培养长成的植株具备了抗病性，这说明目的基因（抗枯萎病的基因）已 。如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中 （填“一定”或“不一定”）含有抗病基因。
试题篮
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