Ti质粒来源于土壤中的脓杆菌，Ti质粒能成功转入植物细胞，并将质粒上的一部分外源DNA整合到植物的基因组中。下图表示利用Ti质粒进行转化获得抗除草剂大豆的过程。请据图回答下列问题（数字表示有关过程）。
（1）获得含目的基因ＤＮＡ的方法一般有两种即： 和 。
（2）Ti质粒分布于脓杆菌细胞的 部分，从其化学本质上看属于 分子。
（3）据图可知，重组质粒导入的受体大豆细胞处于 （未分化 / 已分化）状态，若要通过过程④获得愈伤组织并进一步得到大豆幼苗，需将该受体细胞置于
条件下进行培养，并适时调整 （植物激素名称）的浓度比例进行诱导。
（4）过程④运用了细胞工程中的 技术，该技术的理论依据是 。
（5）上图获得的幼苗在移栽至大田种植的初期，由于幼苗吸水能力差，生理功能较弱，需要控制好 等环境条件（写出两种），待幼苗健壮后再使其在常规条件下生长。
[生物——选修3现代生物科技专题] (15分)
2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP) 方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白(GFP)会发出绿色荧光，可借助荧光跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程：
请根据上述材料回答下列问题：
(1)上述流程中，作为目的基因的是 。
(2)在培育绿色荧光小鼠的过程中，基因表达载体的构建是核心。一个完整的基因表达 载体至少包括目的基因、启动子、终止子、 基因等部分。
(3)过程①用到的工具酶有 ，过程②采用的方法是 ，过程③利用的生物技术是 。
(4)为迅速增加绿色荧光小鼠的数量，可采用试管动物技术。在这项技术中，首先要做的是体外受精和早期胚胎的培养。哺乳动物的体外受精主要包括 、精子的获取和受精等几个主要步骤。
(5)为提高胚胎的利用率，可采用 技术，应该选择发育良好、形态正常的 或囊胚进行分割。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将 进行均等分割。
[生物—选修3现代生物科技专题] (15分)干扰素常用于治疗病毒感染引起的疾病，现在可以通过基因工程大量获得。请回答相关问题。
（1）已知干扰素的氨基酸序列，则获取目的基因的较简单方法是 ，目的基因还可以从cDNA文库获取，但cDNA文库只含某种生物的部分基因，原因是 。
（2）基因表达载体除含有干扰素基因外，还必须有 、 和 等。
（3）如果受体细胞为受精卵，则此过程还涉及到动物细胞培养技术，动物细胞培养的条件包括 、营养、 、气体环境，提供气体中CO2的主要作用是
。
（4）转基因技术是否成功，需要对受体细胞进行分子水平的检测，首先是检测受体细胞
上是否插入目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的头键，检测的方法是 。最后还要检测目的基因是否翻译成了相应蛋白质，利用的技术是 。
人的血清白蛋白 (HAS) 在临床上需求量很大，从人血中提取满足不了人类需求。如果应用现代生物技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会高效地满足人类需求。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根
据下图回答：
(1) 以上过程中涉及到的现代生物技术，属于细胞水平的有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(2) 在基因工程中，我们称①为目的基因，请你举出获取目的基因的常用方法：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(3) 图中②经过＿＿＿＿＿＿＿处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用未受精的卵母
细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞的去核处理一般选择在＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿时期进行。
某课题小组在调查人类先天性肾炎的遗传方式时，发现某地区人群中双亲都患病的几百个家庭中女儿全部患病，儿子正常与患病的比例为1：2。请回答下列问题：
(1) 要调查常见的人类遗传病的遗传方式应选择在家系中进行调查，而调查发病率则应选择在＿＿＿＿＿＿＿中进行调查。
(2)“先天性肾炎”最可能的遗传方式是＿＿＿＿＿＿＿；被调查的双亲都患病的几百个家庭的母亲中杂合子占＿＿＿＿＿。
(3) 基因检测技术是利用＿＿＿＿＿＿＿原理。有先天性肾炎家系中的女性怀孕后，可以通过基因检测确定胎儿是否存在遗传病，如果检测到致病基因，就要采取措施终止妊娠，理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(4) 由于基因检测需要较高的技术，你能否先从性别鉴定角度给予咨询指导? 如何指导? ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
抗旱性农作物因能在缺水环境下正常生长，所以具有重要的经济价值，多数抗旱性农作物能通过细胞代谢，产生一种代谢产物，调节根部细胞液内的渗透压，此代谢产物在叶肉细胞中却很难找到。
（1）解释为什么在抗旱性农作物的叶肉细胞中很难找到与抗旱性有关的代谢产物＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
（2）现有一抗旱植物，其体细胞内有一个抗旱基因R，其等位基因为r（不抗旱），R、r的部分核苷酸序列如下：r：ATAAGCATGACATTA R：ATAAGCAAGACATTA
①r基因由＿＿条核苷酸链组成，请将对应部分补充完整＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
②已知旱敏型rr植物的分生区某细胞在有丝分裂过程中发生了基因突变，其产生的两个子细胞基因型分别为Rr、rr，请在下面方框内画出该分生区细胞突变后的有丝分裂中期图。
（3）现已制备足够多的R探针和r探针，通过探针来检测某植物相关的基因型，据图回答下列问题：
①若已提取到某抗旱植物Rr的叶肉细胞总DNA，（能、不能）＿＿＿＿以DNA为模板直接扩增抗旱基因。扩增过程中寻找抗旱基因的位置依靠＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
②R或r基因经过处理变成单链DNA，若该处理方法不能用解旋酶，可以采用＿＿＿＿＿＿＿＿方法处理。
③DNA杂交发生在＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿两者之间。
④若被检植物发生A现象，不发生C现象，则被检植物的基因型为＿＿＿＿＿＿＿。
⑤若杂交斑的深浅与形成的杂交带的数量成正相关，则ABC形成的杂交斑的深浅强度为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）为培育能稳定遗传的具抗旱性和多颗粒产量的农作物，科研人员按以下流程图进行杂交育种。（注：已知抗旱性和多颗粒属显性，各由一对等位基因控制。）
①杂交育种利用的遗传学原理是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
②在流程图中的“筛选和交配”环节中，你会用什么方法筛选具抗旱性和多颗粒的植物？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
③最早在＿＿＿＿代即可选出符合要求的品种。
④若考虑单倍体育种，则应在＿＿＿＿代选取花粉粒，花粉细胞能发育成单倍体植株，表现出全能性，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
观察下图，回答如下问题：
（1）步骤①和②中常用的工具酶是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）图中质粒上有抗氨苄青霉素和抗四环素两个标记基因，经过①和②步骤后，有些质粒上的＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒，由于目的基因的分隔使得该抗性基因失活。
（3）步骤③是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的过程，为了促进该过程，应该用＿＿＿＿＿处理大肠杆菌。
（4）步骤④：将二角瓶内的大肠杆菌接种
到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，能在C中生长的肠杆菌有＿＿＿种。
（5）步骤⑤：用无菌牙签桃取C上的单个菌落，分别接种到C（含氨苄青霉素和四环素和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于＿＿＿（D、E）上，请在图中相应的位置上圈出来。
白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性人白细胞介素。
（1）在体液免疫过程中，白细胞介素是由＿＿＿细胞分泌的，可作用于受到抗原刺激的B细胞，使B细胞增殖，分化、形成＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿细胞。
（2）目的基因获取：从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37°C培养48h，提取细胞总RNA，生成eDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成eDNA时所加反应物不同
的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 。
（3）重组载体的构建：用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后，用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿酶处理，形成重组载体。该载体与细胞膜上载体的化学本质分别是＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。
（4）将重组载体导入酵母细胞，在培养液中培养一段时间后，收集菌液离心取＿＿＿＿＿＿（上清液/菌体）进行产物鉴定。若要统计培养液中酵母菌的活菌数目，常用的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（5）利用纯化的产物进行细胞培养实验，可研究人白细胞介素对于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 的作用。
科学工作者将抗虫毒蛋白基因通过运载体转入棉花细胞，获得了很好的抵抗棉铃虫的作用。在研制抗虫棉的过程中，利用＿＿＿＿＿＿＿＿，可以快速检查基因表达载体是否导入棉花细胞，然而，即使基因表达裁体已经导入棉花细胞，也不能确定转基因过程已经取得成功。因此，在该项工程的最后阶段，需要做如下一系列检测：
（1）用放射性同位素标记的＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿作探针，可以分别检测棉花细胞中是否有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）向棉花细胞的匀浆中加入特定的＿＿＿＿，可以检测棉花细胞中是否能够产生抗虫毒蛋白。
（3）除了上述分子水平的检测外，还需要做个体水平检测。其方法是：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 。
科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠一人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠一人嵌合抗体的过程。请据图回答：
（1）鼠源杂交瘤抗体就是从免疫的小鼠脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与＿＿＿＿＿＿＿＿融合，形成＿＿＿＿＿＿细胞，并通过体内培养或体外培养生产的单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于它的＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，并可大量制备。
（2）与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用＿＿＿＿＿＿＿＿诱导融合。
（3）生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞，主要原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠一人嵌合体，属于＿＿＿＿工程的范畴。
1990年美国科学家对一个免疫缺陷症的四岁女童实施了基因治疗，即将腺苷酸脱氨酶基因导入取自患者的淋巴细胞中，使淋巴细胞能产生腺苷酸脱氨酶，然后将此淋巴细胞转入患者体内，半年后该女孩产生抗体的能力显著改善。从90年成功转移腺苷酸脱氨酶基因到现在，大部分基因治疗的临床实验，都是从病人体内获得某种细胞，进行培养，然后在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内达到治疗的目的。
（1）腺苷酸脱氨酶基因可通过显微注射等方法导入淋巴细胞中，选用淋巴细胞作受体细胞的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，若这女孩长大后结婚，将该正常基因传给后代的几率为＿＿；
(2) 基因治疗过程中通常要对受体细胞进行培养，其培养液中通常含有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，若在营养全面的动物细胞培养液中不慎混入了一种细菌，结果所培养的细胞全部死亡。从科学严谨性的角度考虑，能不能直接认为这些细胞的死亡就是该种细菌作用而导致的？＿＿＿＿，理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，请设计实验验证你的说法：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，并预测结果，得出结论：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；
（3）如果上题实验的结果为A组中细胞死亡，B组中正常存活，说明是该种细菌的作用导致了细胞的死亡。对此现象，又有两种观点：一种认为是该细菌本身对细胞有毒害作用，另一种观点认为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；为验证两种说法哪种正确，某同学设计了相关实验步骤进一步验证，请你作出适当补充：
①＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；②＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；③将实验装置置于与上述实验完全相同的无菌条件中培养，定期进行观察检测。结果与结论：如果实验结果为细胞正常存活，说明＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；如果实验结果为细胞死亡，说明＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(16分)人的血清蛋白在临床上需求量很大，通常从血中提取。由于艾滋病等人类传染病
造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品心存疑虑。生物技术的发展与应用使利用动物生产人的血清蛋白成为可能，如图是上海某研究所培育生产出血清蛋白奶牛的流程。根据下图回答：
（1）雌性奶牛胚胎细胞是（ ）
| A．雌性奶牛产生的卵细胞 |
| B．雌性奶牛体内的受精卵 |
| C．能发育成雌性奶牛的受精卵 |
| D．从奶牛胚胎上取出的细胞，这个奶牛胚胎将发育成雌性奶牛 |
（2）将人的血清蛋白基因导入奶牛胚胎受体细胞时，常用方法是＿＿＿＿＿；选择早期胚胎细胞应该选择＿＿＿＿＿期的细胞。
（3）小牛1、2、3的性别是＿＿性，性状＿＿＿＿。
（4）人体血清蛋白基因的表达要经历＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿两个过程，该基因能够在小牛体内表达产生人的血清蛋白，说明生物共用一套＿＿＿＿＿。
（5）此操作流程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等。
科学家将人的生长激素基因与质粒重组后，导入牛的受精卵，并成功从牛奶中提取到了人生长激素，操作流程如下图所示，请据图回答。（已知限制酶I的识别序列和切点是－G↓GATCC－ ，限制酶II的识别序列和切点是－↓GATC－）。
（1）获取目的基因的主要途径包括从已有物种细胞中提取和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）据图分析，在构建重组质粒的过程中，目的基因用＿＿＿＿＿＿＿＿进行了切割。
（3）获能的精子和卵细胞相遇后首先发生＿＿＿＿＿＿反应，之后精子接触卵黄膜，并进一步与卵结合，在该过程中，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿可以防止其它精子入卵。
（4）图中“受体”是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；“符合要求的个体”是指＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（5）将牛受精卵进行人工培养后，一般可选择＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿期的、发育良好的胚胎进行移植。
科学家通过基因工程，成功培育出耐盐水稻，回答下列问题：
(1)拟南芥的耐盐基因(TTTU)之所以能“嫁接”到水稻细胞内，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(2)将导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用＿＿＿＿＿＿＿＿技术。
(3)为了确定耐盐水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的＿＿＿＿＿＿＿＿作探针进行分子杂交检测，又要用形态学大田鉴定法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
(4)利用基因工程技术培育耐盐水稻，相比诱变育种和传统的杂交育种方法，具有＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等突出的优点。
囊性纤维化是由CF基因引起的遗传病。人类个体中存在一个或多个核苷酸不同的短序列（SNP），而且存在个体差异，可以作为标记基因进行分析。据图回答问题：
（1）CF基因的根本来源是 ，该基因位于 染色体上，被分析母本的基因组成是 （纯合子或杂合子）
（2）第7位（最右）孩子只具有患病基因而缺少SNP标记基因，其最可能原因是
。
（3）囊性纤维化（CF）患者呼吸系统受损最为严重，呼吸道分泌的粘液适于绿脓杆菌的繁殖，绿脓杆菌分泌的外毒素A可使人体的蛋白合成受阻并引起组织坏死。针对外毒素人体需要有特异的 与它结合，才能使它丧失毒性，此物质是在特异性免疫的 免疫过程中产生的。对脓杆菌的感染者可以利用细胞工程制备的 进行特异性诊断。
（4）虽然囊性纤维化合体患者的病情非常严重，但杂合个体不会患霍乱或伤寒，因此该突变基因在人群中频率相对较 （高或低）。在此欧地区的人群中，有4%的人是CF基因携带者。如果一个CF基因携带者且色觉正常的男性与另一个CF基因携带者且父母正常、弟弟患红绿色盲性结婚，则他们的子女中既是CF隐性基因纯合体又不患色盲的概率为 。
试题篮
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