限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，在质粒上有该酶的一个切点。 （1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
（2）质粒的化学本质是 ，可以作为哪一种基因操作工具？ 。
（3）要将用限制性内切酶Ⅰ切开的质粒与已经修饰好的目的基因连接起来，需要用到的基因操作工具是 ，该工具能将两个DNA分子末端的 和 连接起来，形成重组DNA分子的骨架。
研究表明：H5N1型禽流感病毒是一种能在人和禽类之间传播的RNA病毒，H5N1禽流感病毒囊膜上存在一种具有识别作用的特异糖蛋白（A）。科学研究者对禽流感病毒进行基因测序后获得了糖蛋白A的有关基因，并试图运用基因工程及发酵工程技术大量生产禽流感病毒的“基因疫苗”。试完成下列有关问题：
（1）对禽流感病毒的“基因测序”时的主要工作目标是________________。
（2）利用糖蛋白A相关基因生产基因疫苗的过程如下： 
试回答：
①上述过程图中属于基因工程范畴的操作是________，基因工程技术的明显优点是________________________________。
②实现过程①除需要病毒基因作为模板外，还需要________________。获得的“工程菌”需要扩大培养以获得更多菌种用于生产，在扩大培养过程中一般采用通气培养，选择这种培养方法的优点是________________________________。
③发酵过程是发酵工程的中心阶段，在这一阶段应注意严格控制__________________等发酵条件，以获得稳定的产量，工业生产中一般采用________方法。
978年美国科学家利用基因工程技术，将人类胰岛素基因拼接到大肠杆菌的DNA分子中，然后通过大肠杆菌的繁殖，生产出了人胰岛素，操作过程如图所示：
（1）在上述基因操作中，由①→②过程所用的基因“剪刀”是 ；由③→④过程的实现是通过与①→②过程相同的 切割的结果；由④→⑤过程需要 连成重组DNA分子；由⑥→ ⑦过程是通过细胞的 实现的。
（2）不同生物间基因可以“移植”成功的基础是DNA的 结构。大肠杆菌可以生产出人类的胰岛素，说明它们和人类作用一套 ，大肠杆菌合成人胰岛素的过程可以表示为 。
（3）形成的重组DNA分子是否真正转移到了受体细胞，必须对受体细胞进行检测。
请根据下面实验原理和材料用具，设计实验选择运载体-质粒，探究质粒的抗菌素基因所合成的抗菌类别。
实验原理：作为运载体的质粒，须有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌，其质粒才可能用作运载体。
材料用具：青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。
方法步骤：
第一步：取三个含细菌培养基的培养皿并标1、2、3号，在酒精灯旁，用三支注射器，分别注入1 mL蒸馏水、青霉素、四环素液，并使之分布在整个培养基表面。
第二步：将接种环在酒精灯上燃烧用来灭菌，并在酒精灯火焰旁取种，然后对三个培养皿接种。
第三步：培养。将接种后的三个培养皿放入37℃的恒温箱中培养24 h。
预期结果分析：
①设置1号的目的是 ，出现的现象是 。
②若3号不存活，1、2号存活则 。
③若2号不存活，1、3号存活则 。
下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程的示意图。请据图回答下列有关问题：
（1）科学家在进行图中［①］操作时，要用 分别切割运载体和目的基因，运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过 而结合。
（2）基因工程的理论基础是 法则，可用公式（图解）表示为 。
（3）Ⅲ是导入目的基因的受体细胞，经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因自交产生F1代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的 。将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，后代往往有很多植株不再具有抗虫特性，原因是 。要想获得纯合子，常采用的方法是 。
（4）下列是几种搭配的密码子，据此推断图中合成的多肽，其前三个搭配的种类（按前后顺序排列） 。
［甲硫氨酸（AUG）、甘氨酸（GGA）、丝氨酸（UCU）、酪氨酸（UAC）、精氨酸（AGA）、丙氨酸（GCU）］
下图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶的酶切位点，
为青霉素抗性基因，
为四环素抗性基因，
为启动子，
为终止子，
为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括
、
在内的多种酶的酶切位点。
据图回答：
（1）将含有目的基因的与质粒表达载体分别用
酶切，酶切产物用
连接酶进行连接后，其中由两个
片段之间连接形成的产物有、、三种。若 要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行。
（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是。
（3）目的基因表达时，聚合酶识别和结合的位点是，其合成的产物是。
（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是。
为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。
(1)获得耐盐基因后，构建重组分子所用的限制性内切酶作用于图中的处，
连接酶作用于处。（填"
"或"
"）。
（2）将重组分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和法。
（3）由导入目的基因的水稻细胞培育成植株需要利用技术，该技术的核心是和。
（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测，又要用的方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答：
（1）A过程需要的酶有 。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是 。
（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入 。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用 作为探针。
（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与 杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1∶1。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为 。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占
%。
天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：
（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是，用将淀粉酶基因与载体拼接成新的分子，下一步将该
分子，以完成工程菌的构建。
（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用检测；将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，该现象发生的原因是。
（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？
（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？
某质粒上有Sal I、HindIII、BamH I三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题．
(1)将含有目的基因的DNA与质粒分别用Sal I酶切，酶切产物用 催化连接后，两个DNA片段的连接结果有 种。
(2)在构建重组质粒时，应选用 两种酶对 进行切割，
以保证重组DNA序列的唯一性。
(3)为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入 ，理由是 。
(4)将转人抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用 技术，愈
伤组织经 进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培
养基中添加 。
今年甲型H1N1流感在美国、墨西哥等国先后爆发。甲型H1N1流感的传播速度非常快，为防治疫情，各国研究小组纷纷进行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作。下面为某研究小组的前期研究工作的简要操作流程图：
（1）实验步骤①所代表的反应过程是 。
（2）实验中常采用PCR扩增得到H基因, PCR过程中使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其主要特点是 。PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？____ ______。
（3）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用的酶是 ，其作用部位为两个核苷酸之间的 键。
（4）构建重组表达载体时，一般需要将H基因与载体结合，常用的载体除质粒外还有
等，在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上 的表达。
（5）甲型H1N1流感患者常出现体温升高的症状，人体的体温调节中枢位于 。若某人为甲型H1N1流感疑似患者，在确诊时可从疑似患者体内分离病毒与已知病毒进行
比较。
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人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
（1）过程①代表的是 。
（2）过程③构建A基因重组载体时，必须使用 和 两种工具酶。
（3）过程⑥是 。
（4）过程⑦采用的实验技术是 ，获得的X是 。
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测
干扰素是治疗癌症的重要物质，它必须从人血中提取。每升人血中只能提取0.05 μg；故价格昂贵，某基因公司采用如图所示的方法生产干扰素。请据此图回答：
（1）首先从人的细胞中取出干扰素基因作为_________。
（2）将此基因插入细胞质粒的切口处时，用的“剪刀”是_________，若要使它和经过处理的细菌质粒基因结合，必须使用_________将它们缝合。
（3）为了快速、高产、低成本生产该产品，就将此质粒移植到酵母菌体内，因为酵母菌能大量快速繁殖。酵母菌快速大量繁殖的方式是____________。
目前有关国家正在联合实验一项“人类基因组计划”，这项计划的目标是绘制４张图，每张图均涉及人类一个染色体组的常染色体和性染色体，具体情况如下：两张图的染色体上都标明人类全部的大约３～３．５万个基因的位置（其中一张图用遗传单位表示基因间的距离，另一张图用核苷酸数目表示基因间的距离）；一张图显示染色体上全部ＤＮＡ约３０亿个碱基对的排列顺序；还有一张是基因转录图。参加这项计划的六国科学家，他们在２００２年初已将草图初步完成。科学家认为，人类基因组计划对整个世界都会产生影响，你认为完成“人类基因组计划”有哪些意义？
人体受到病毒刺激后可以产生干扰素，干扰素分为α．β．γ三类。1980年生物学家成功地破译了α干扰素的全部遗传信息，并运用插入质粒的方法，用大肠杆菌生产，得到的干扰素可以用于治疗肝炎和肿瘤。回答下列问题：
（1）上述材料中涉及到的现代生物技术有 。
（2）人体中能合成干扰素的细胞是 ，合成的场所是细胞中的 。
（3）在利用大肠杆菌生产干扰素过程中，目的基因是 ，所用的运载体是 。
DNA亲子鉴定测试原理是：从被测试者的血液或口腔黏膜细胞或者培育的组织内提取DNA，用限制性内切酶将DNA样本切成特定的小片段，放进凝胶内，用电泳推动DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会聚集在一起，然后用特别的染料在X光下，便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码；每个人的条码的一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。请回答：
⑴下列有关限制性内切酶的叙述中错误的是（ ）
A．有高效性 B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C．主要存在于某些微生物体内 D．限制酶主要破坏碱基对之间的氢键联系
⑵“探针”的化学本质是 （ ）
A．某一个完整DNA B．含目的基因的特定DNA片段
C．由目的基因控制合成的蛋白质分子 D．与目的基因互补的特定单链DNA
⑶条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。为什么？
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⑷样品DNA经PCR技术（聚合酶链式反应）扩增，可以获得大量DNA分子克隆。其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA人工复制（如下图）。PCR技术中运用到的酶与人体中
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的酶相比具有的特点是 。PCR技术有何明显优点
试题篮
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