下图是将酪蛋白基因转移到烟草细胞内的示意图，请据图回答下列问题。
(1)图中Ti质粒是来自土壤农杆菌体内的小型环状DNA，其特点是Ti质粒上的TDNA(可转移的DNA)可以转移到________，并且整合到__________________________________________。
(2)酪蛋白基因与Ti质粒相结合形成_____________，该过程用到的工具酶有_____________。
(3)将酪蛋白基因导入植物细胞后，需要进行基因的检测与鉴定，首先要检测________________，其次要检测________________，最后需要检测酪蛋白基因是否翻译成酪蛋白，检测酪蛋白是否合成的方法是________。
下图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程图，请据图回答下列问题。
(1)②过程用到的工具有______________________________________。
(2)③过程常用的具体方法是_____________________________。
(3)重组质粒中除含有目的基因外还要含着________、标记基因。
(4)图示过程中涉及的具体技术手段有________、________、_________。
(5)该重组细胞培养至一定阶段可通过________方法，从而一次获得多个转基因猪。
人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示（注：基因B为高血压相关基因）。
（1）进行①过程之前，需对人工采集的精子进行 处理。完成②过程常采用的方法是 ，④过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的 。
（2）从人体细胞中获取基因B时用到的工具酶是 ，在构建的基因表达载体中，高血压相关基因的首端必须有 ，它是RNA聚合酶的识别和结合部位。
（3）图示中甲为 （时期）的去核卵母细胞，⑤过程操作技术叫做 。
（4）要在分子水平上检测成功导入的B基因在大鼠中是否成功表达，可采用 方法，如果高血压相关基因已在大鼠体内成功表达，可用其建立高血压转基因动物模型。
下图为绿色荧光小鼠制备流程图， Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：
（1）构建表达载体需要的酶是： ，表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、 、 、终止子和复制原点等。
（2）图中载体上的NEO基因是一种抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418是一种抗生素（对细胞有毒害作用），添加G418的目的是_ 。
（3）图中所用的胚胎干细胞来自于 。
（4）图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的 位置，图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素处理，目的是 。
（5）可以使用 __方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。
转基因克隆猪已经在我国培育成功。研究组首先从猪胎儿皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆。接着，将重组胚胎移入代孕母猪体内，最终获得转基因克隆猪。请回答：
（1）在对纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的 ，以防止培养过程的污染。此外，应定期更换 ，防止 对细胞自身造成危害。
（2）筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的 。
（3）在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集 ，并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞注入到 中，再经过一系列过程获得含有目的基因重组胚胎。
（4）为了 ，可以对处于 阶段的胚胎进行均等分割。将重组胚胎移入到受体子宫后，由于受体子宫不会对外来胚胎发生 ，并能与之建立正常的 上的联系，因此，重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪。
（5）生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡。这最主要体现了生态工程的 原理（只填一项）。
阅读如下材料，回答下列问题：
资料Ⅰ:马铃薯是世界近两亿人民的主要食物。但病毒侵染后导致产量大幅下降，故而培育脱毒或抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。
资料Ⅱ：人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。
(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖培养成脱毒苗。此过程说明植物细胞具有________。
(2)为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用 技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内，其导入常使用________法，该方法是先将目的基因插入到相应菌Ti质粒的________上，最终进入植物细胞并插入到植物细胞的________上。
（3）制备单克隆抗体过程中要用到_______________技术。
（4）最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________。
（5）为了更多地生产出人HCG，可将相关的人的基因转入牛受精卵中。有人构思采用胚胎分割技术，获得更多相同的转基因牛，应选择_____________时期的胚胎。
根据所学生物学知识回答下列问题：
（1）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。
（2）目前临床上使用的红细胞生成素（一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血）主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO）。检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的
细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成，在融合过程中至少需要进行 次筛选。
（3）在“试管牛”的培育过程中，采用激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞，最常用的激素是 。从良种公牛采集的精子需 后才能进行受精作用；防止多精入卵的两道屏障依次为 、 。
（4）生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理
| A．协调与平衡原理 | B．物种多样性原理 | C．物质循环再生原理 | D．整体性原理 |
（5）运用基因工程技术已经创造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需从cDNA文库中获取，并与____________________等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成为表达载体；再通过_________方法，将表达载体导入羊的______________，获得重组细胞。将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过_________处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加__________。
科学家将人的胰岛素基因与质粒重组后，导入牛的受精卵，并成功从牛奶中提取到了人胰岛素。回答下列相关问题：
(1)获取目的基因的主要途径包括________和________。
(2)在构建基因表达载体的过程中，目的基因和质粒用同一种________进行切割。
(3)在将基因表达载体导入牛的受精卵的过程中，常采用_______法，若将基因表达载体导入大肠杆菌细胞中，则通常采用_______溶液处理大肠杆菌，使其成为_______细胞。
(4)为了得到较多的卵细胞，可以对受体母牛注射适宜剂量的________；利用获能的精子进行体外受精，经过细胞培养至________期，最后进行____________移植，最终获得“符合要求的个体”，具体是指__________________。
有机磷农药杀虫能力强，在粮食增产、传染病防治等方面作用显著，但污染环境并危害人体健康。在众多的有机磷农药残留物降解技术中，生物降解有高效、彻底、无二次污染的优势，其中，微生物由于具有较复杂多样的代谢途径，是有机磷农药降解的主力军。
⑴在富含有机磷农药残留成分的土壤中，更容易分离到能降解农药的微生物。根据达尔文的理论，这是因为有机磷农药对于此类微生物具有 作用。
⑵微生物具有复杂多样的代谢途径，从根本上说，是由微生物的 所决定的。
⑶微生物主要通过酶促反应，将有机磷农药分解为无毒或者低毒的化合物。研究发现，利用有机磷农药降解酶净化农药比利用微生物菌体更有效。
①微生物群体中，最初的降解酶基因是由于 而产生的。从微生物中提取到一种降解酶后，需要确定在何种环境中该酶的活性高，检测酶活性高低的指标可以是 。
②从天然菌株中提取降解酶的含量低，成本高，难以大量应用，科学家通过基因工程解决了这一难题。他们在获得降解酶基因后，通过 技术对该基因进行大量扩增，再利用 酶、 酶和运载体等作为基本工具，通过一定的手段构建目的基因表达载体，并将其导入大肠杆菌体内，从而实现了高效表达。
③天然的降解酶对有机磷农药的降解率比较低，不能达到预期效果，科学家对降解酶特定部位的氨基酸序列进行重新设计、改造，显著提高了其降解能力，这项工程技术称为 。
白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性的人白细胞介素。
（1）目的基因获取和扩增：
①从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37℃培养48h，提取细胞总RNA，经 作用生成cDNA。
②根据已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成cDNA时所加反应物不同的是 （至少写出两种）。
（2）重组载体的构建：由图中可知：酶切载体和目的基因用的是___________酶，经DNA连接酶处理，形成重组载体。重组载体的化学本质是 
（3）将重组载体导入酵母细胞，在培养液中培养一段时间后，利用纯化的产物进行细胞培养实验，可研究人的白细胞介素对于 的作用。
下图是将人的生长激素基因导入细菌细胞B制造工程菌的示意图。已知细菌细胞B不含质粒A，也不含质粒A上的基因。质粒A导入细菌细胞B后，其上的基因能得到表达。请回答下列问题
（1）目的基因可通过PCR技术获取，这一技术中需要的酶是 。
（2）将目的基因与质粒结合形成重组质粒的过程中，需要的工具酶有_______________。
（3）若要检测目的基因是否导入，可在培养细菌B的培养基中加入__________，若在培养基上观察到大量的细菌B的菌落，表明目的基因已成功导入细菌。检测工程菌是否产生出生长激素的方法是
（4）将重组质粒导入细菌B的过程称为 。
下图表示两种限制性核酸内切酶识别DNA分子的特定序列，并在特定位点对DNA进行切割的示意图，请回答以下问题：
(1)图中甲和乙代表______________________________________________________。
(2)EcoRⅠ、HpaⅠ代表________________________________________________。
(3)图中甲和乙经过相应操作均形成两个片段，切口的类型分别为________、________。甲中限制酶的切点是________之间，乙中限制酶的切点是________之间。
(4)由图解可以看出，限制酶的作用特点是__________________________________________
下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，同时AOX1基因也会因受到诱导而表达[5’AOX1和3’AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子]。
资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。
(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上________、________限制酶识别序列，这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
(2)酶切获取HBsAg基因后，需用________将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取________。
(3)步骤3中应选用限制酶________来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。
(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用________方法进行检测。
(5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入________以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。
下图表示以某种农作物①和②两个品种分别培育出不同品种的过程。请回答:
（1）用①和②经过程Ⅰ、Ⅱ培育成⑤，属于 育种，其原理是 。
（2）用③和④培育成⑤的过程属于 育种，过程Ⅲ常用的方法是 。
（3）过程Ⅳ常用的方法是 ，品种⑥是 倍体。
（4）③导入外源基因C后培育成⑦，应用的原理是 ，该过程需用到 、 和 3种工具。利用这种方法育种最大的优点是 。
（5）②经射线处理培育成⑧的原理是 。该方法的成功率相对较低，其原因是 。
河北农科院的科学家通过基因工程培育抗虫棉时，需要从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因，“放入”棉花的细胞中与棉花的DNA结合起来并发挥作用，请回答下列有关问题：
（1）从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是 ，此工具主要存在于 中，其特点是 。
（2）苏云金芽孢杆菌一个DNA分子上有许多基因，获得抗虫基因常采用的方法是“ ”。具体做法是：用限制性核酸内切酶将苏云金芽孢杆菌的DNA切成许多片段，然后将这些片段 ，再通过运载体转入不同的受体细胞，让它们在各个受体细胞中大量复制，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把 分离出来。
（3）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤依次是 、
、 、 。
试题篮
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