人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。
（1）图中的高血压相关基因作为____，质粒作为 ，二者需用 __________一切割后连接成重组载体。
（2）将该基因通过____法注入鼠的 细胞。
（3）子代大鼠如果检测出 ，和表现出 ，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白，具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性。请分析回答：
（1）干扰素的产生受细胞内基因的控制，通常处于抑制状态。在病毒刺激下，干扰素基因经 、翻译形成干扰素前体，进一步加工后形成成熟的干扰素，通过 方式分泌到细胞外。
（2）某些干扰素可作用于宿主细胞膜上的相应受体，激活该细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通过激活RNA酶使病毒的mRNA ，有些则可与 （细胞器）结合，通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用。
（3）某些干扰素可抑制肿瘤细胞DNA的合成，通过减慢细胞 分裂过程抑制肿瘤。还有些干扰素可提高吞噬细胞将抗原呈递给 细胞的能力，从而在免疫调节中发挥作用。
（4）获取干扰素的传统方法是从人的白细胞中提取，但产量很低。科学家利用 酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子（即RNA聚合酶 的部位）等调控组件连接在一起，采用 的方法将重组DNA导入牛的 细胞中，经胚胎早期培养一段时间后移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛。大大提高了干扰素的产量。
逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示。图上的“逆转录病毒序列 ”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因，获得大量重组逆转录病毒。（E、F、H分别为限制酶 E、F、H的酶切位点）。
（1）逆转录的模板是_____,原料是_____。
（2）在构建重组质粒时，目的基因插入该质粒，此过程需要的酶是限制酶____和____0
（3）将重组质粒转人大肠杆菌前用某种离子处理大肠杆菌使之成为_______才能完成转化过程。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加_____的培养基进行培养。
（4）获取大量重组质粒后,可培育转基因小鼠，将重组质粒导入小鼠受精卵的方法是_______。若目的基因进人细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是______________。
（15 分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。
据图回答下列问题：
（1）过程①所需的酶是 。
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 。原生质体经过 再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 植株的根尖，通过 、 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4 进行PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株1—4 中一定是杂种植株的有 。
（6）对杂种植株进行 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
生物工程技术为人们获得需要的生物新品种或新产品提供了便利。请据图回答：
（1）②过程常用的方法是__________。可以采用__________技术，培育出多头基因型相同的转基因犊牛。
（2）在抗虫棉培育过程中，④常用的方法是__________，⑤过程采用的技术是__________。该技术中，愈伤组织细胞可培育成单个胚性细胞，利用胚性细胞再分化形成的__________可制成人工种子。在分子水平上，可采用__________的方法来检测转基因抗虫棉的抗虫基因是否成功表达。
（3）当获能后的精子与卵子相遇时，首先发生__________反应，释放出有关的酶直接溶解卵丘细胞之间的物质，形成精子穿越放射冠的通路。防止多精入卵的生理反应依次有__________、__________。（时间顺序不可颠倒）
应用生物工程技术能获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：
|
（1）在培育转基因牛的过程中，①过程需要的酶是 ，
②过程常选取牛的 细胞作为受体细胞，③过程涉及的生物技术有 。根据所学生物学知识回答：（第4小题1分，其他每空2分）
（1）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。
（2）目前临床上使用的红细胞生成素（一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血）主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO）。检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠 细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。
（3）在“试管牛”的培育过程中，采用激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞，最常用的激素是 。从良种公牛采集的精子需 后才能进行受精作用。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。
（4）生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理（ ）
| A．协调与平衡原理 | B．物种多样性原理 |
| C．物质循环再生原理 | D．整体性原理 |
分析有关资料，回答有关遗传、基因工程问题。
油菜的株高由等位基因 G 和 g 决定，GG 为高杆，Gg 为中杆，gg 为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B 基因与 G 基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题：
（1）步骤①中用到的工具酶是 ，培育转基因油菜主要运用了转基因技术和 技术。
（2）图中质粒是双链闭合环状的DNA分子，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图甲所示。
①该质粒的长度为___________kb。在该质粒中，M酶与N酶的切割位点分别有__________、 个。
②M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接，请将连接的结果表示出来：____________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割：_______________。
下图为B基因的结构示意图以及限制酶M和N的切割位点。
③现用图中基因作为目的基因，若采用直接从供体细胞中分离，可选用酶______来切割。
④已知Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区转录的mRNA中A和U总数是 。
（3）若将一个B 基因转移到矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且B 基因与g 基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜植株表现型为 。
（4）若将一个B 基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如下图）。
①与甲的株高相同的是 。四种转基因油菜分别自交，在不考虑交叉互换的前提下，子代有3 种表现型的是 。
②另有一种转基因油菜自交子代也有3 种表现型，请在下图中的染色体上标出B 基因的位置。
1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。请据图回答：
（1）首先根据胰岛素的氨基酸序列，推测出原胰岛素mRNA上的碱基序列，再根据 原则，用人工方法合成⑧DNA，通过这一过程获得了 基因。
（2）图中①从大肠杆菌的细胞中提取 ，过程②须用 酶切割。
（3）图中⑤表示的是 的过程，图中③表示的是 分子。
（4）④过程表示将 分子导入 细胞。
（5）若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)，操作过程见下图，那么所形成的重组质粒pZHZ2___________。
| A．既能被E也能被F切开 | B．能被E但不能被F切开 |
| C．既不能被E也不能被F切开 | D．能被F但不能被E切开 |
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示。请据图回答。
（1）口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，要获得VP1基因可用 的方法合成DNA，利用该方法可构建________文库
（2）如想大量获得VP1基因，可利用_________技术，该技术需要的酶为_________。
（3）进行过程⑤之前需要在培养基中添加 从而筛选出含有重组质粒的叶片小段，并且培养基及所有的器械都要进行_______处理。进行过程⑤时应注意控制的外界条件是
（4）该转基因番茄产生的配子中______含有VP1基因
A. 一定 B. 一定不 C.不一定
请回答下列关于细胞内的某些生理活动的相关问题：
I．观察下面的某生理过程示意图(甲表示甲硫氨酸，丙表示丙氨酸)，回答问题：
（1）人体细胞中可进行①→②生理过程的结构有 。
（2）丙氨酸的密码子是 。
（3）若②中尿嘧啶和腺嘌呤之和占42％，则相应的①分子片段中胞嘧啶占其中一条单链的最大比例为 。
（4）从化学组成分析，下列生物中与图中结构③的化学组成最相似的是
| A．乳酸杆菌 | B．噬菌体 | C．染色体 | D．HIV |
II．科学研究发现人体内胰岛素的合成、分泌与胰岛B细胞内乳酸的含量有密切关系（如图所示）。请分析后回答：
(1)血管屮的O2进入胰岛B细胞的方式为______，细胞在呼吸作用过程中直接与O2发生反应的物质是______。
(2)该细胞中产生CO2的场所是______。
(3)据图分析生活在成都平原的人初到青藏高原，血液中胰岛素的含量会________。
猪的基因和人类的基因存在一定的相似度。据报道经特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右，起保护创面免受感染的作用。移植猪皮后，还要在猪皮上开很多小口，在小口处植入患者的自体皮肤组织，自体皮肤慢慢生长，逐渐覆盖原先创面，而猪皮最终会掉光。为了使移植的猪皮存活更长时间，有人设法导入人的相关基因（用P表示），获得转基因小白猪。其简要流程如下图所示：
据图中信息并结合课本知识回答：
（1）过程①中形成重组研蛆常用的酶有限制性核酸内切酶和 ；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是 。
（2）过程②中，常用 酶处理，将皮肤组织块分散戍单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒、通气、适宜的温度、pH以及 。
（3）图中的卵母细胞应在体外培养到 ，并作除去细胞核的处理；过程③中所用的技术是 ；能代替图中卵母细胞的还可以是 。
（4）图示技术除可用于器官移植外，还用于 。
请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA 片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A 的DNA 片段所占的比例为________。
②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA 片段。
(2)设计引物是PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。
①第1 组：________________________；
②第2 组：________________________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA 聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA 聚合酶的功能，这是因为____________________________________________________________。
(4)用限制酶EcoRV 、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA 片段长度如下图(1 kb 即1 000 个碱基对)，请画出质粒上EcoRV 、MboⅠ的切割位点。
(26分)Ⅰ．科学家从某抗旱植物中得到抗旱基因(R)，培育出抗旱转基因农作物。回答下列问题：
(1)在基因工程中，抗旱基因(R)被称为______。“分子缝合针”DNA连接酶按来源不同可分为____________和____________两类。
(2)如果用农杆菌转化法将R基因导入农作物细胞的染色体DNA上，应先将R基因插入农杆菌Ti质粒的______上，然后再让该农杆菌去感染农作物细胞。
(3)转基因农作物细胞经植物组织培养可得到转基因农作物植株，该过程的技术关键是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞先后进行____________。
(4)若得到的抗旱转基因农作物植株的基因类型有甲或乙两种(R基因的整合位点如下图，只考虑其中的两对染色体，且R基因都能正常表达)，让该植株自花传粉，若子代抗旱植株所占比例为100％，则R基因的整合位点属于图______类型。
Ⅱ．图l是高等动物细胞亚显微结构模式图，图2是某雄性生物的细胞分裂示意图，图3表示图2生物细胞分裂过程中不同时期细胞内染色体、染色单体和DNA含量的关系。请据图回答问题：([ ]中填序号或字母，______填文字)
(1)若图1表示人体骨髓干细胞，则该细胞可能会发生图2中[____]细胞所示的分裂现象，星射线的形成与图1中[ ]__________有关。
(2)若图1表示浆细胞，则与抗体形成和分泌有关的单层膜细胞器是_______(填字母)。含18O的氨基酸在浆细胞内的代谢过程中产生了H218O，那么水中的18O最可能来自于氨基酸的______ (填基团)。
(3)若该个体有两对等位基因(YyRr)，分别位于两对同源染色体上，则图2中A细胞相对应的基因组成可能为____________
(4)基因的自由组合发生于图3中的______时期(填罗马数字)，图3由III变化为IV应于图2中的细胞变化是______。
2012年诺贝尔医学和生理学奖授予英国科学家约翰·戈登和日本科学家山中伸弥。约翰·戈登在20世纪60年代做过一个划时代的实验：把美洲爪蟾的小肠上皮细胞核注入去核的卵细胞，结果发现一部分卵依然可以发育成蝌蚪，其中的一部分蝌蚪可以继续发育成为成熟的爪蟾。山中伸弥等科学家将四个关键基因转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多功能干细胞（iPS），这些干细胞可再转化成老鼠体内任何种类的细胞。回答下列问题：
（1）约翰·戈登之后，科学界利用该技术进行更多细胞核转移实验，复制出多种哺乳类动物。在哺乳动物的核转移实验中，一般通过 （物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（2）从卵巢中吸取的卵母细胞，一般要培养到 阶段才能用于实验。
（3）利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植的原因是 。
（4）在山中伸弥的实验中，利用了逆转录病毒，该病毒的作用是 。
（5）一般情况下，体外扩增目的基因常用的方法是 。在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增值，这种现象称为细胞的 。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用 处理。
试题篮
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