Ⅰ．微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：
（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自__________________的土壤。
（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用____培养基，此培养基中添加________作为微生物生长的唯一碳源。培养基灭菌采用的最适方法是________法。常用的接种方法是____________和__________________。
（3）接种后需密封培养，由此推测该类微生物的代谢类型是__________，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取________________就可获得高效菌株。
Ⅱ．我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养，最终发育成完整的新植株。下图是细胞培养形成兰花植株示意图，请据图回答：
（1）图示兰花培养的技术称为____________________，原理是____________________。图中③和④分别表示______________和________________过程。
（2）在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入________________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值______（高/低）时，有利于根的分化。
（3）在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证__________________。
【生物——选修1：生物技术实践】下图甲是以苹果为原料生产果醋的生产工艺，乙曲线表示温度、酒精度对醋酸发酵的影响，请分析回答问题：
(1)酒精发酵的适宜温度为18℃-25℃，温度过高，酵母菌代谢减慢甚至死亡，原因是温度过高，影响______ 。
(2)酒精发酵转入醋酸发酵时，酒精度范围为______%，并将温度控制在______0C左右，此外还需调整的发酵条件是通入_______空气。
(3)酒精发酵初期溶液中有气泡产生，气泡的成分是______。在整个发酵过程中pH的变化趋势是：逐渐__________。
(4)为提高果酒的品质，更好地抑制其他微生物的生长，除接入合适的菌种外，还应对原料和装置分别进行____________。调整糖度，是为了给酵母菌提供丰富的______源。
请回答下列与生物技术实践相关的问题：
（1）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。
①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有 和 。
②虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、_________________________
（2）酵母菌是一种真菌，可用于制作果酒。果汁发酵后是否产生酒精，可以用__________来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现的颜色为 。
（3）加酶洗衣粉中有的加香精，高档洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的，目前从植物中提取芳香油的方法有__________ 、____________ 、____________等。
利用不同微生物的发酵作用来制作果洒，果醋、腐乳和酸奶等食品的历史悠久，遍布民间，一般称作传统发酵技术。根据传统发酵技术的相关知识，回答以下问题：
（1）果酒和果醋的制作：
①酵母菌是酿制葡萄酒不可缺少的微生物，如果要获得优质野生酵母菌最好在葡萄园的土壤中采样，利用酵母菌发酵制作葡萄洒要控制的温度为 。
②果酒发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下呈现 色。
③喝剩的葡萄酒放置一段时间后变酸的原因是（用化学反应式表示） 。
（2）腐乳的制作：
①腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是 。
②豆腐发酵主要利用微生物产生的蛋白酶和脂肪酶等，通过发酵，豆腐中营养物质的种类 （减少、增多），且更易于消化和吸收。
（3）乳酸发酵：
①含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是 。
②测定泡菜中亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生 反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成 染料。
（1）传统发酵技术应用十分广泛，果酒和果醋就是常见例子。当发酵装置由果酒酿造转为果醋酿造时，首先要提高 ，其次要注意通入 。
（2）微生物培养基通常在压力为100kPa，温度为 ℃条件下，灭菌15至30min，然后待培养基冷却
至 ℃时，在酒精灯火焰附近倒平板。
（3）菊花的组织培养，一般选择 的茎上部新萌生的侧枝；进行菊花组织培养时，一般将pH控制
在 左右，温度控制在18至22℃，并每天光照12h。植物激素中，生长素和细胞分裂素是关键性激素。
（4）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，柑橘芳香油的制备通常使用 法。为提高出油率，
需要将柑橘皮干燥去水，并用 浸泡。
克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。
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如图简单表示了葡萄酒的酿制过程，请据图分析：
（1）葡萄酒的酿制原理是先通气进行 ，以增加酵母菌的数量，然后再 获得葡萄酒。
（2）随着发酵程度的加深，液体密度会逐渐变低（可用密度计测量），原因是 。
（3）验证果胶酶在果汁生产中的作用 ：在课题实验步骤中，在完成“烧杯中分别加入苹果泥、试管中分别加入果胶酶溶液、编号编组”之后，有下列两种操作：
方法一：将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥相混合，再把混合液的pH分别调至4、5、6、……10。
方法二：将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥的pH分别调至4、5、6…10，再把pH相等的果胶酶溶液和苹果泥相混合。请问哪一种方法更为科学： ，并说明理由： 。
（4）下列叙述中不正确的是（ ）
| A．在甲中进行搅拌是为了增加氧溶量 | B．在甲中，酵母菌的能量来源将全部消耗 |
| C．甲与乙放出的气体主要是二氧化碳 | D．揭开丙容器的盖子，可能会有醋酸产生 |
(11分)“树橘柚者，食之则甘，嗅之则香”，每年的10月，正是柑橘大量上市的季节。橘子全身都是宝：不仅果肉的营养价值高，药用价值较高，其皮、核、络、叶都是“地道药材”。请回答下列问题。
(1)江南某橘子盛产地想建立一个大型的果酒、果醋加工厂，需要的发酵菌种是_________和________。分离纯化这两种微生物的常用方法是：将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用______将菌液铺平。这种接种方法称为______。
(2) 提取桔皮的胡萝卜素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是________________________________________________________________________。
(3)四川一果汁加工厂在制作橘子汁的过程中发现果汁有些浑浊，为提高出汁率，可加入适量的________________使果汁变得澄清。
(4) 培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值____________(填“高”或“低”)时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是______________________________________________。
(5)为了检测其中某种菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B两种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A ；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B ；
回答下列I、Ⅱ小题：
I.下图为制作果酒、果醋的实验流程，请回答：
（1）制作果酒的发酵阶段，发酵瓶的瓶盖应（ ）
| A．一直打开 | B．打开并盖上一层纱布 | C．定时拧松 | D．一直拧紧 |
（2）写出由果酒酿制成果醋过程的总反应式： 。
（3）从自然菌样中筛选较理想的醋酸杆菌进行纯化培养，通常采用 接种方法，接种之前要对接种环进行 ，避免接种环上可能存在的微生物污染培养基。
Ⅱ.某中学生物兴趣小组分工合作，探究密闭装置中环境因素对草本沉水植物水蕴草光合作用强度影响的实验。实验数据如下：
（表中初始值、终结值是指溶解氧含量，单位为mg.L-1）
分析表中数据回答下列问题：
(1)实验一的自变量是_____，因变量是_____;自来水和冷开水中溶解氧数值均下降，说明____
(2)实验二第_______组植物的光合作用强度最强，实验二结果说明_______。
(3)实验三第_______组植物的有机物积累量最多，造成这种现象的原因可能是_______。
［生物——选修模块1：生物技术实践］
胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下:
(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用稀释涂布平板法或 。采用后一种方法接种时需先灼烧接种环，其目的是 。
(2)培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供 。欲纯化此工程菌，可以采用_____________法将菌种接种在__________培养基上，以获得________菌落；进行扩大培养时，应选用__________培养基。
(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好 和时间以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用水浴方式加热以防止 ；萃取液浓缩前需进行 ，其目的是去掉不溶物。
(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素，鉴定过程中需用 作为(实验)对照。
胡萝卜素可以预防白内障、有助于保护眼睛晶体的纤维部分，还可以促进眼内感光色素的生成，加强视力的形成；还可以预防夜盲症，加强眼睛变色的功能。请根据其提取过程及胡萝卜素的性质，回答下列问题。
（1）胡萝卜素是 色结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素，常用 作为溶剂，原因是 。
（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是 法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、 、 、过滤、浓缩。
（3）在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将 和 控制在一定范围，原因是 。
I、（每空1分）苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。
| KH2PO4 |
1.4g |
| Na2HPO4 |
2.1g |
| MgSO4·7H2O |
0.2g |
| FeCl3 |
0.1 g |
| X |
1g |
| 维生素 |
微量 |
| 琼脂 |
15g |
| 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL |
（1）此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供 和 ，该培养基从作用看属于 。
（2）下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是 ，图B效果的接种方法是 。
II、（每空2分）根据植物组织培养和生物有效成分的提取的知识回答下列问题：
（1）菊花的组织培养常用的培养基是 ，原理是 。
（2）月季的花药离体培养，从花粉粒的选择上看，应选择 期的花粉粒为宜。
（3）从茶籽中提取茶油一般最好采用 法，工业上提取胡萝卜素一般采用萃取法，鉴定该色素的方法是 法。
普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽胞杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。
⑴图甲中，过程①需要的酶有 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以 作为唯一碳。②、③过程需要重复几次，目的是 。
⑵某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是 ；推测该同学接种时可能的操作失误是 。
⑶以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种 菌的发酵罐需要先排气，其原因是 。
(10分)下图为某工厂设计的芦柑加工工艺流程，请分析回答：
(1)为提高出汁率，过程②可使用 酶处理，该酶是一类酶的总称，包括半乳糖醛酸酶、 酶，为提高该酶的利用率常采用 技术；过程③常常接种的菌种是 ，并且需要严格控制氧分压。
(2)芦柑果皮可用来提取香精油，过程④最好采用的方法是 法。为提高出油率，材料需经过 处理，然后漂洗。
(3)现获得一株无子突变芦柑，研究人员要在较短时间内获得大量突变植株，最好采用 的方法，该过程中需要对外植体进行 处理。在上述过程中，所用到的培养基及器材都需要严格灭菌，工作台需要用 擦拭。培养基中除基本营养成分之外，还需要添加 。
腐乳、腌白菜等以其色泽诱人、味道鲜美时常出现在人们的餐桌，这几种食品都是经过腌制加工而成的，请回答下列问题：
（1）腐乳制作过程中，多种微生物参与发酵作用，其中起主要作用的微生物是一种______状真菌。图中A表示 ，制作腐乳坯时用沸水处理豆腐的目的是 ，豆腐含水量不能过高原因是 。
（2）腐乳制作过程中加盐的作用是___ _____和__ ___。
（3）制作腐乳的卤汤中通常要加入料酒、黄酒等，含量一般控制在12％左右，其目的是 。
（4）泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是乳酸，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用 法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶联成 色化合物。
（5）据图可知腌白菜在腌制_________天后食用最佳。
试题篮
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