（共10分）请回答下列生物技术方面的问题。
（1）微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和__________________法，后者是将菌液进行一系列的________________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，再进行________________。菌落是在固体培养基上由________________繁殖而来的形态可见的子细胞群体。
（2）菊花的组织培养的大致过程如图所示，请回答下列问题：
图中B、C依次表示__________过程(填名称)，添加的两种关键激素是___________________。该实验操作成功的关键是_____________，所以要对外植体、超净工作台等进行___________，对培养基或培养器具等进行_______。
（3）同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离(如图)，他在操作中加样的正确顺序是_______.
【生物----选修1：生物技术实践】常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。请分析回答下列问题:
（1）制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是 。
（2）取从自然界中采集的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养。
图乙是经过图甲过程A纯化培养的结果，在培养基上接种时划线的顺序依次是 (用编号表示)。研究者在图甲过程C的操作培养过程中，得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是 。
（3）将培养基上的酵母菌菌株转接到 的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。从存活的酵母菌中提取DNA，经大量扩增获得目的基因。
（4）将目的基因连接到质粒上，该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因。将重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏 能力的酿酒酵母作为受体菌。
（5）将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以 和 为碳源的培养基中进行发酵能力测试。随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能 ，即所需菌株培育成功。
【生物——选修1生物技术实践】如图为胡萝卜素的纸层析结果示意图，请据图回答问题：
（1）该图所示的鉴定方法称为____________。
（2）基线一般距底边________cm。
（3）A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是_______，属于提取样品的样点是________，点样的要求是_____________。
（4）在图中的层析谱中，①代表的物质是____________，②代表的物质是_____________。
（5）该层析的目的是________________。
选考[生物——生物技术实践](15分)回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：
（1）苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 来检验。
（2）严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物， 通常所指的发酵条件不包括 。
| A．温度控制 | B．溶氧控制 | C．pH控制 | D．酶的控制 |
（3）苹果酒在 的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是 .
（4）腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是 。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于 。
（5）在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加 。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是 。
下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题。
⑴血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有运输功能，一个血红蛋白分子至少含有_________个游离的氨基。
⑵甲装置用于______，原理是______。
⑶乙装置中，C溶液是______。用乙装置分离蛋白质的方法叫______。
⑷用乙装置分离血红蛋白时，待______接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。
⑸血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。其中样品处理包括：红细胞的洗涤、______、分离血红蛋白溶液；纯度鉴定常采用的方法是______。
[生物——选修1：生物技术实践]
请回答下列有关细胞和分子生物学技术的问题:
(1)DNA粗提取的实验原理是:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在 mol/L的NaCl溶液中的最低;鉴定DNA所用的试剂是 ,沸水浴加热呈 色;实验中使用酒精的目的是 ;实验过程中两次用到蒸馏水,第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出DNA,第二次目的是 。
(2)PCR技术的中文全称是 ,在操作过程中需要添加引物,它的化学本质是 。反应过程中控制不同温度的意义是不同的: 90℃以上时 ,双链DNA解聚为单链;50℃左右时 ,引物与两条单链DNA结合; 72℃左右时延伸,Taq DNA聚合酶有最大活性,使DNA新链沿着 方向延伸。
(3)血红蛋白的提取和分离实验中,分离纯化常用的方法有凝胶色谱法和电泳法,前者的原理是 ,后者的原理是 ,在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是 。
下面是某同学制作果酒、果醋的实验流程示意图。
（1）发酵罐1和发酵罐2中的微生物在结构上的主要区别是前者____ ，要保证酒精发酵和醋酸发酵的正常进行，除了满足适宜的温度、pH等条件外，还需做到 。
（2）判断发酵罐1中优势菌种的数量最简单的实验方法是 ，通过此种方法统计获得的优势菌种的数量往往 （大于、小于）发酵罐1优势菌种活菌的实际数量。
（3）下图表示纯化菌种的操作过程，过程一是 方法，过程二是 方法，欲从发酵罐2中分离出优势菌种并进行计数应选用过程 。
（4）分离并获得菌种后，若需长期保存，应使用 法。
下图是花药培养产生花粉植株的两种途径，回答下列相关问题：
(1)通过花药培养产生花粉植株，该过程依据的生物学原理是_____________，
图示两种产生花粉植株的途径并没有绝对的界限，主要取决于培养基中__________。
(2)选材时，从花粉发育来看，一般选择处于________期的花粉培育成功率较高。确定花粉发育时期最常用的方法是_____________________。
(3)材料消毒过程中用到的试剂有________、0.1%的氯化汞溶液、无菌水。
(4)消毒后的花蕾，要在________条件下接种到培养基上，培养过程中不需要光照，同时要控制好温度。
(5)在花药培养中，常常会出现________的变化，因此需要对培养出来的植株做进一步的鉴定和筛选。
(6)在配制用于植物组织培养的MS培养基时，往往需要加入适量的蔗糖，理由是___
根据从胡萝卜中提取胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质，回答下列问题。（1）胡萝卜素是
色的结晶，从胡萝卜中提取胡萝卜素，常用 作为溶剂，原因是 。
（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是 法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、 、 、 。
（3）在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将 和 控制在一定范围内，原因是 。
（4）提取的胡萝卜素可通过 法进行鉴定，在鉴定过程中需要用 对照。
（5）一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 比。
(10分)生物技术与我们的生活密切相关，如微生物发酵制作果酒、果醋的历史源远流长。请回答下列问题:
(1)果酒的制作离不开酵母菌。酵母菌是一类 (呼吸类型)微生物。在缺氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸的反应式为 。
(2)温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。酒精发酵时一般将温度控制在 ℃，
在发酵过程中，随着酒精度数的提高，葡萄酒呈现深红色的原因是 。在发酵获得葡萄汁的过程中为了提高出汁率，可以使用果胶酶，它可以将果胶分解为 。
(3)酵母菌广泛分布在自然界中，现要将其从土壤中分离出来应接种到特定培养基上，
这种培养基叫 培养基，该实验中使用的试管、接种环和 可放入干热灭菌箱中灭菌，培养过程中需要对酵母菌进行计数：取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、 180、 220。则样品中微生物的数量为 个/mL。该统计结果 （低于/高于)实际值，原因是 。
（12分〕某厂对苹果进行深加工的菌种得由筛选及生产流程如图甲所示．
〔l）苹果压榨过程中加入 酶可提高榨汁率；图甲中发酵罐I进行的代谢反应式为 ；发酵罐II需接种 菌，与发酵罐I相比，需要不断通入 。
（2）图乙表示发酵罐I、II中主要物质的变化，曲线 代表酒精的变化．可用 试剂检测酒精的有无。
（3）为获得用于生产的理想的酵母菌种，需向平板内的固体培养基中加入一定量的 进行选择培养，培养时平板须倒置，可防止 ；用稀释涂布平板计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低．这是因为
玫瑰是著名的观赏花卉，也可用来提取玫瑰精油。下面与玫瑰相关的实验，请分析回答问题：
（1）玫瑰精油易挥发，化学性质稳定，难溶于水，适合用____________法来提取。
（2）某花农发现园圃中有一株玫瑰出现新的花色，欲利用组织培养技术大量繁殖，选材非常关键，植物材料的选择直接关系到实验的成败。若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至______期的花药培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的方法有_______法；若花粉不易着色，需采用__________法。
（3）在组织培养过程中激素的浓度等多种因素都会影响实验结果。某同学在进行组织培养过程中，发现只分裂而不分化出芽和根，可能原因是 。
(选修1——生物技术实践)（共15分）生物技术实践与人们的生产和生活密切相关。请回答下列有关问题。
(1)进行菊花组织培养的基本操作步骤是制备MS固体培养基、_______ _、接种、培养、移栽、栽培。花药离体培养时，选择合适发育时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是_______ 。花粉经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中______ 。
(2)如图一表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图中的X溶液为________ ，其作用是_______________ 。用注射器滴加海藻酸钠与酵母菌混合液时，应将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止_________ 。
(3)为了探究某加酶洗衣粉中碱性蛋白酶含量与洗涤效果的关系，某同学通过实验获得如图二所示的结果。由图可知，加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是______%，本实验的自变量是 _______________ 。
(生物——选修1：生物技术实践)
下列为生物技术在生产实践中的应用，请回答问题：
（1）在制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素。结果发酵失败，原因是__________。
（2）纤维素分解菌可用于农作物秸秆还田，用__________染色法鉴别纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会出现透明圈，其大小能反映 。
（3）农业生产上可以利用植物组织培养的方法来获得较多优良柑橘苗。 培
养基是常用的一种培养基，能为外植体细胞提供大量元素、微量元素和有机物。在配置好的该培养基中添加的生长素和细胞分裂素是 的关键性激素。
（4）利用培养基不仅可以进行植物组织培养，也可以分离培养大肠杆菌。与植物组织培养明显不同的是，用于大肠杆菌培养的培养基中不需要加入 。
（5）工业上通过提取橘皮精油作为食品、化妆品的配料，提取时通常采用新鲜材料，原因是 ；对于压榨后得到的糊状液体，除去其中的固体物可采用的方法是 。
【生物选修模块一：生物技术实践】
人类利用微生物发酵制作果酒、果醋以及腐乳的历史，源远流长。请回答下列相关问题：
（1）果酒的制作离不开酵母菌。酵母菌是 微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，反应式为 ；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，一般将温度控制在 ℃。在缺氧、 的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成 和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和 。在多种微生物的协同作用下，普通的豆腐转变成风味独特的腐乳。
（3）醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。当缺少糖源时，醋酸菌将 变为 ，再将 变为醋酸。
试题篮
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